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英文名稱：T4 DNA Ligase
CAS號：9015-85-4
級別：BR
分子量：55.3kDa，單體
來源：含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度：1u/ul(200CEU/ul）
活性定義：是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中，37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量（weiss單位，1個weiss單位相當(dāng)于約200個粘性末端連接單位。1個粘性末端連接單位：20ul反應(yīng)體系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量）
酶活性分析混合物：66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液（#B69）：400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
50% PEG溶液：50%（w/v）聚乙二醇4000
抑制劑：當(dāng)反應(yīng)體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時，可強(qiáng)烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活：65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意：聚乙二醇（PEG）可*地增加平末端DNA的連接效率，PEG4000在反應(yīng)體系中的*濃度為5%（w/v）；T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率，為避免此現(xiàn)象，電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下：樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存；轉(zhuǎn)化時，連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細(xì)胞體積中的10%；電轉(zhuǎn)化之前，先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase，然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制：測試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測：粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀：液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團(tuán)和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口，連接DNA的粘性和平末端，但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途：生化研究。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接；雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接；雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù)；連接酶介導(dǎo)的RNA檢測；位點特異性突變；擴(kuò)增片段長度多態(tài)性
保存： -20°C
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CAS:72235-53-1,3,4-二氟芐胺 311530050
CAS:529-40-8 ,OMBUIN(P)(PLEASE CALL) ASB-00015360-000
CAS:16816-67-4 ,PANTETHINE, D-(RG) ASB-00016057-100
3-乙炔基吡啶，2510-23-8，>98.0%(GC)(T)，5G| E0560-5G
2'-氟苯乙酮，445-27-2，>97.0%(GC)，5G| F0364-5G
聚乙二醇單-4-辛基苯基醚 n≈10，9002-93-1，500G| P0873-500G
CAS:5736-94-7,4-正己氧基苯甲醛 411671000
CAS:2934-97-6 ,TETRAHYDROPALMATINE, DL-(P) ASB-00020175-050
常用的烴類校正用的標(biāo)準(zhǔn)品 5x1mL 純度：2000 μg/mL in n-Pentane Room temperature DRH-TX-001-10X-PAK
N-，128-53-0，>98.0%(LC)(N)，1G| E0136-1G
CAS:5728-52-9,4-聯(lián)苯乙酸 188150100
順-1-異丙基-4-甲基環(huán)己烷，6069-98-3，>97.0%(GC)，5ML| I0284-5ML
2-氟苯甲醛，446-52-6，>97.0%(GC)，25ML| F0190-25ML
CAS:13623-94-4,1,1-雙(甲硫基)-2-硝基乙 305690050
CAS:7781-98-8 ,ETHYL-3-HYDROXYBENZOATE(SH) ASB-00005344-100
CAS:121-01-7,2-氨基-5-硝基三氟 188230050
CAS:148461-14-7,(4S)-(-)-4,5-二氫-2-[2'-(二苯基磷)苯基]-4-異丙基惡唑 353731000
CAS:122-04-3,4-硝基苯甲酰 150430050
CAS:102-28-3,3-氨基乙酰 344150050
D-別異*，1509-35-9，>98.0%(T)，5G| A0212-5G
3,5-吡唑二羧酸二乙酯，37687-24-4，>98.0%(GC)，1G| D3507-1G
CAS:57378-72-0 ,ISOCHLOROGENIC ACID C(SH) ASB-00009212-005
CAS:81397-67-3 ,ACETOXYVALERENIC ACID(P) ASB-00001090-025
Quetiapine Hydroxy Impurity-d8 1mg
2-(對基)苯甲酸，7148-03-0，>98.0%(GC)(T)，25G| T2377-25G
CAS:3339-73-9,3-鄰苯二甲酰亞胺丙酸 391000010
CAS:13455-24-8,重碘酸氫鉀 211471000
CAS:17685-05-1，苯基-β-D-葡糖苷酸 1g Freezer -20℃
CAS:3766-60-7，炔草隆/播土隆 10mg Room temperature P-301N
CAS:14206-58-7,4-差向* 257711000
CAS:327-57-1 ,NORLEUCINE, L-(AMINOCAPROIC ACID)(RG) ASB-00014525-001
5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)-2-基)-1H-吲哚，269410-24-4，>98.0%(GC)，1G| I0590-1G
2-甲基-3-丁-2-醇，115-18-4，500ML| M0178-500ML
CAS:25395-31-7,二醋精/甘油二乙酸酯 406305000
CAS:130-15-4 ,NAPHTHOQUINONE,1,4-(RG) ASB-00014052-100
CAS:484-11-7 ,NEOCUPROINE(RG) ASB-00014235-010
2,2,6-*基-6-乙基四氫吡喃-3-醇(異構(gòu)體的混和物)，14049-11-7，>98.0%(GC)，25G| T2605-25G
CAS:95-48-7，鄰甲酚 1mL 1000 μg/mL in MeOH Room temperature M-8040-04
CAS:38444-73-4，2,2',6-三聯(lián)苯 5mg Room temperature C-019N
CAS:95-49-8,2- 150200050
CAS:1635-61-6,5--2-硝基 246950050
CAS:15764-16-6,2,4-二甲醛 165791000
CAS:13241-33-3 ,NEOHESPERIDIN(SH) ASB-00014250-005
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