*條鏈 cDNA合成試劑盒 產品描述
HieffTM First Strand cDNA Synthesis Kit基于HieffTM Reverse Transcriptase,該酶熱穩(wěn)定性提高,在50℃的半衰期超過240min,且可長時間耐受高達55℃的反應溫度,適合具有復雜二級結構的RNA模板的逆轉錄,能穩(wěn)定可靠地合成cDNA。且HieffTM Reverse Transcriptase的*設計,進一步增強了模板親和力和行進性,使得全長cDNA的合成能力有了大幅度提升,可獲得長達20 kb的cDNA,并且對于常見的逆轉錄抑制物具有更高的耐受度,非常適合于植物組織RNA的逆轉錄反應。
本試劑盒包含由總RNA或mRNA合成高質量*條鏈cDNA所需的所有成分,并提供兩種cDNA合成引物:Random hexamers和oligo(dT)18。合成的單鏈cDNA產物可直接用來進行后續(xù)PCR、qPCR以及PCR克隆。其中,5 × RT Mix包含優(yōu)化的緩沖體系和dNTP; HieffTMEnzyme Mix包含HieffTM Reverse Transcriptase和RNase inhibitor??筛鶕枰?,選擇Oligo (dT)18、Random hexamers或基因特異引物作為逆轉錄引物。
*條鏈 cDNA合成試劑盒運輸與保存方法
冰袋(wet ice)運輸。產品在-20 oC保存。有效期1年。
質量控制
所有組分經檢測均無核酸外切酶、核酸內切酶、RNase殘留。
功能檢測1:以500 ng mouse total RNA為模板,Oligo dT18為引物,50℃反應45分鐘。取1/10 cDNA產物進行PCR擴增nebulin基因。瓊脂糖凝膠電泳,EB染色,可見有單一的20.0 kb條帶。
功能檢測2:以100 pg Hela cell total RNA為模板,Oligo dT18為引物,50℃反應30分鐘。取1/10 cDNA產物進行PCR擴增β-actin基因。瓊脂糖凝膠電泳,EB染色,可見有單一的550 bp條帶。
功能檢測3:以500 ng Hela cell total RNA為模板,Oligo dT18為引物,55℃反應45分鐘。取1/10 cDNA產物進行PCR擴增Polε基因。瓊脂糖凝膠電泳,EB染色,可見有單一的4.8 kb (GC-rich)條帶。
功能檢測4:以1 pg-1 μg HeLa cell total RNA為模板,以Oligo dT18和Random hexamers為引物,測試qRT-PCR性能。
以6個數量級的模板量的對數值對Ct值做標準曲線,R2>0.990,斜率在-3.20到-3.60之間。
客戶需要準備的材料
1.RNase free的1.5 ml微量離心管或0.2ml PCR管
- PCR儀
- (高質量的完整的RNA對于獲得高質量的cDNA是至關重要的。
引物選擇
1) 如果模板為真核生物來源,建議選擇Oligo dT18,其與真核生物mRNA的3’Poly A尾配對,可獲得zui高產量的全長cDNA。
2)基因特異性引物 (GSP)的特異性zui高。但有些情況下,用于PCR反應的GSP無法有效引導*鏈cDNA合成。這時,可改用Oligo dT18或Random hexamers重新進行逆轉錄。
3)Random hexamers特異性zui低,所有RNA,包括mRNA、rRNA、tRNA均可以作為Random hexamers的模板。當目標區(qū)域具有復雜二級結構或GC含量較高,或者模板為原核生物來源,使用Oligo dT18或基因特異性引物 (GSP)無法有效引導cDNA合成時,可使用Random hexamers為引物。
kl-9399R ANKRD40錨蛋白重復結構域蛋白40抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1252R API5凋亡抑制因子5抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1253R AQP3水通道蛋白-3抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1254R APOD載脂蛋白D抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-7641R ACSM3丁?;?合成酶3抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-7643R ARTS1脂肪細胞源性*氨基肽酶抗體(血管內皮細胞生長因子誘導蛋白) 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-7655R AIFM2線粒體凋亡誘導因子2抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1230R ABL2ABL2蛋白抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0439R ACE血管緊張素轉換酶ACE1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1004R ACE2血管緊張素轉換酶2抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0120R AcinusAcinus抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1227R Ack1醋酸激酶1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0443R ACTH (1-39)促腎上腺皮質激素(1-39)抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0442R ACTH (18-39)促腎上腺皮質激素ACTH(18-39)抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0004R ACTH (7-23)促腎上腺皮質激素ACTH (7-23)抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0039R ADNP活性依賴的神經保護肽抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-6852R Alpha 1 Acid Glycoproteinα1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-7565R Alpha 1 acid glycoprotein 2α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2) 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-4610R phospho-AQP2(Ser264+261)磷酸化水通道蛋白2抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1907R ATTY細胞*轉氨酶抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1930R Vasopressin抗利尿激素/血管升壓素/加壓素/血管加壓素抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1960R ABCF1ATP結合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2405R AKR1B1醛糖還原酶抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0945R Serum albumin人血清白蛋白抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0935R Anthrax炭疽菌抗體(采用活疫苗制備) 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1531R ATF4活化轉錄因子4抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0299R Adenylate Kinase 1腺苷酸激酶-1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1571R F-Actin纖維狀肌動蛋白抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1176R Agrin聚集蛋白抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0037M AIF調亡誘導因子抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0037R AIF調亡誘導因子抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0097R ALK間變型淋巴瘤激酶抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-0840R AMACRα-甲基?;?消旋酶抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1562R Annexin A1膜粘連蛋白A1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-3602R ATG1/ULK1自噬相關蛋白1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2199R beta Amyloid 1-16β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16 抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1565R APCDD1腺瘤肉調節(jié)蛋白抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-1632R APPL1銜接因子蛋白含pH域蛋白1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2506R AQP7水通道蛋白-7抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2532R ALT1/Alanine Transaminase谷*氨基轉移酶1抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2936R ARHG7p21活化蛋白激酶ARHG7抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-6465R phospho-APE(Ser1417)磷酸化肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2640R ADO2-氨基乙硫醇雙加氧酶抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-2097R Angiotensin II Type 1 Receptor血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml
kl-10217R ADORA2B腺苷A2b受體/神經生長因子1受體抗體 【性 狀】: Lyophilized or Liquid【濃 度】: 1mg/1ml