貨號：WT-E5600【人組蛋白去乙?；?HDAC)ELISA試劑盒酶免法實驗】ELISA試劑盒定量測定

ELSIA操作步驟復(fù)雜， 影響反應(yīng)因素較多， 特別是固相載體的包被難達到各個體之間的*， 因此在定量測定中， 每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。 測定大分子量物質(zhì)的夾心法 ELISA， 標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬， 曲線zui高點的吸光度可接近2. 0， 繪制時常用半對數(shù)紙以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦， *較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。【人組蛋白去乙酰化酶(HDAC)ELISA試劑盒酶免法實驗】 甲胎蛋白質(zhì) ELI SA測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線示例見圖4-1。測定小分子量物質(zhì)常用競爭法（參見2.2），其標(biāo)準(zhǔn)曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。 ELISA測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線示例見圖4-2。注意圖中橫坐標(biāo)為對數(shù)關(guān)系， 這更有利于測定系統(tǒng)的表達。【人組蛋白去乙酰化酶(HDAC)ELISA試劑盒酶免法實驗】

假陽性多，本底高甚至花板原因：1：過期試劑不能使用2：加樣時注意更換吸頭。盡可能避免污染。3：避免加酶時污染，應(yīng)對先加樣后加酶的操作，加酶時要注意吸頭不要接觸標(biāo)本，造成污染。當(dāng)可能造成污染時，一定要更換吸頭，切忌僥幸心理。4：注意控制恒溫箱溫度，盡可能讓其穩(wěn)定在37±0.5℃。5：如果整個操作時間過長、造成反應(yīng)時間不同（*孔與zui后一孔反應(yīng)時間相差很懸殊）。氣溫高時更明顯。建議在盡可能短的時間內(nèi)完成操作。盡量不要堆積多塊板子操作（尤其手工操作時）。6：按照要求倍數(shù)稀釋洗液，避免洗液稀釋倍數(shù)過高。7：洗板次數(shù)按試劑要求，不可任意減少洗板次數(shù)，8：洗板時浸泡時間不夠，應(yīng)按要求操作，并適當(dāng)延長浸泡時間。9：手工洗板方式需要正確，洗板時，垂直加入洗液，保證一定的沖擊力；洗液要注滿板孔，并保證30-60秒的浸泡時間。10：防止組分的污染。如使用容器，注意容器的清潔。【人組蛋白去乙酰化酶(HDAC)ELISA試劑盒酶免法實驗】

重復(fù)性不好：重復(fù)同一樣品時，加樣量與加樣時間相同；同時注意移液器的校準(zhǔn)。加樣后應(yīng)該將酶標(biāo)板放置在微量振蕩器上，充分混合；標(biāo)本保證*、無污染；盡可能由同一名操作人員操作。盡可能模擬相同的反應(yīng)條件。

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