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定點(diǎn)突變試劑盒

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公司名稱上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
品牌其他品牌
型號(hào)
所在地上海市
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
更新時(shí)間2022/6/13 11:00:31
訪問次數(shù)434

產(chǎn)品標(biāo)簽:

定點(diǎn)突變試劑盒 10T

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公司介紹主營產(chǎn)品

上海邦景實(shí)業(yè)有限公司（Shanghai Bangjing Industrial Co., Ltd.，China）是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。

上海邦景實(shí)業(yè)有限公司（Shanghai Bangjing Industrial Co., Ltd.，China）先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒；另有針對(duì)各種動(dòng)物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。

公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù)，力求為我國科研事業(yè)更好的，更專業(yè)的服務(wù)！

公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請退換，有技術(shù)疑問可隨時(shí)給于解答，一對(duì)一的客服服務(wù)，客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。

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進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種

產(chǎn)品簡介在線詢價(jià)

編號(hào)	BJ-F0164554

定點(diǎn)突變試劑盒及公司其它各類產(chǎn)品：急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞;THP-1
PDGFRA Others Human PDGFRa / CD140a 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
CL-0453TE-10(食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) NRRL 2543[LSHTM BB325]細(xì)胞 HFL-I(MEMα)(胚肺成纖維細(xì)胞)
細(xì)胞;C-33A

定點(diǎn)突變試劑盒產(chǎn)品信息

中文名稱：定點(diǎn)突變試劑盒
英文名稱：HiperMut Site-Directed Mutagenesis Kit
產(chǎn)品規(guī)格：10T
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號(hào)：BJ-F0164554
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹：

本試劑盒是基于HiperClone快速克隆技術(shù)的定點(diǎn)突變系統(tǒng)。使用本試劑盒，目標(biāo)質(zhì)粒擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)DpnI消化、HiperClone重組環(huán)化后直接進(jìn)行轉(zhuǎn)化即可完成定點(diǎn)突變。

本試劑盒由兩個(gè)模塊組成：Hiper II Pfu DNA聚合酶擴(kuò)增模塊和HiperClone快速克隆模塊。Hiper II Pfu DNA聚合酶高的保真度顯著降低了擴(kuò)增過程中引入新突變的可能性，其的長片段擴(kuò)增能力，廣泛適用于長度小于20kb的任何質(zhì)粒擴(kuò)增。HiperClone快速克隆系統(tǒng)用高效的同源重組反應(yīng)替代傳統(tǒng)的退火成環(huán)反應(yīng)。因此使用HiperMut定點(diǎn)突變試劑盒進(jìn)行DNA定點(diǎn)突變時(shí)，引物設(shè)計(jì)更加靈活，且擴(kuò)增反應(yīng)不再需要以線性方式進(jìn)行，極大減少了模板使用量，有于原始甲基化模板的*降解。HiperClone技術(shù)可以高效完成兩個(gè)PCR產(chǎn)物的無縫拼接，因此該試劑盒還能以單次擴(kuò)增的方式對(duì)目標(biāo)質(zhì)粒上不連續(xù)的兩個(gè)位點(diǎn)同時(shí)進(jìn)行突變。

本試劑盒中的重組酶Exnase經(jīng)過優(yōu)化，專門針對(duì)單堿基、不連續(xù)雙堿基定點(diǎn)突變。此外，如擴(kuò)增產(chǎn)物特異，其DpnI消化產(chǎn)物可不進(jìn)行DNA純化而直接用于重組反應(yīng)。高度優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、快捷的操作流程以及*的成功率，使得本試劑盒成為DNA定點(diǎn)突變選產(chǎn)品。

保存：-20℃，有效期1年。

使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運(yùn)送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時(shí)間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時(shí)不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。

注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。