河南專業(yè)科研細(xì)胞實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)-效勝實(shí)業(yè)
效勝實(shí)業(yè)河南專業(yè)科研細(xì)胞實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
本公司開展了石蠟包埋、石蠟切片、冰凍切片、HE染色,massson染色,PAS染色等染色,免疫組化,免疫熒光,WB .PCR.透射電鏡,掃描電鏡,細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn)服務(wù),*,周期短;胞劃痕介紹:
細(xì)胞劃痕是一種簡(jiǎn)單易行的檢測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的方法,實(shí)驗(yàn)成本低,可以用來檢測(cè)貼壁生長(zhǎng)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。
細(xì)胞劃痕內(nèi)容:
材料:6 孔板(其他的也可以,但感覺6孔比較好,大小適中)、marker筆直尺、20微升槍頭(滅菌)、無血清培養(yǎng)基、PBS
步驟:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺(tái)內(nèi))
1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃?rùn)M線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2.在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
3.第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜。
4.用PBS洗細(xì)胞3次,去處劃下的細(xì)胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5.放入37度5%co2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)。按0,6,12,24小時(shí)取樣,拍照。
細(xì)胞劃痕注意事項(xiàng):
一般做劃痕實(shí)驗(yàn),都是在無血清或者底血清狀態(tài)下培養(yǎng)的,否則細(xì)胞增殖就不能忽略。
按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕,可以形成若干交叉點(diǎn),作為固定的檢測(cè)點(diǎn),這就解決了前后觀察時(shí)位置不固定的問題。