一個基因表達(dá)結(jié)果是產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)（或酶）。因此檢測蛋白質(zhì)是測定基因表達(dá)的主要標(biāo)志，檢測蛋白質(zhì)的方法很多，除ELISA法外，也可用與檢測DNA和RNA相類似的吸印方法。前兩法有“南”和“北”之意，故本法遂被延伸稱為Western（西）印跡法，該法能用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分辨出與專一抗血清結(jié)合的專一性蛋白質(zhì)。將聚丙烯酰胺凝膠上分辨出的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上并與一抗體共孵。一抗體專一地與待分離蛋自質(zhì)的抗原決定簇結(jié)合，然后用另一種蛋自質(zhì)，如135I-蛋白A或辣根過氧化物酶連接的山羊抗IgG檢測已結(jié)合上去的抗體。本法所需時間6小時或過夜。 蛋白質(zhì)的聚丙烯酰胺凝膠電泳 幾乎所有蛋白質(zhì)電泳分析都在聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行，而所用條件總要確保蛋白質(zhì)解離成單個多肽亞基并盡可能減少其相互間的聚集。常用的方法是將強(qiáng)陰離子去污劑SDS與某一還原劑并用，并通過加熱使蛋白質(zhì)解離后再加樣于電泳凝膠上。變性的多肽與SDS結(jié)合并因此而帶負(fù)電荷，由于多肽結(jié)合SDS的量幾乎總是與多肽的分子量成正比而與其序列無關(guān)，因此SDS多肽復(fù)合物在聚丙烯酰凝膠電泳中的遷移只與多肽的大小相關(guān)。在達(dá)到飽和的狀態(tài)下，每克多肽約可結(jié)合1.4克去污劑，借助已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)參照物，則可測算出多肽鏈的分子量。 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳大多在不連續(xù)緩沖系統(tǒng)中進(jìn)行，其電泳槽緩沖液的pH值與離子強(qiáng)度不同于配膠緩沖液，當(dāng)兩電極間接通電流后，凝膠中形成移動界面，并帶動加入凝膠的樣品中所含的SDS多肽復(fù)合物向前推進(jìn)。樣品通過高度多孔性的積層膠后，復(fù)合物在分離膠表面聚集成一條很薄的區(qū)帶（或稱積層）。曲于不連續(xù)緩沖系統(tǒng)具有把樣品中的復(fù)合物全部濃縮于極小體積的能力，故大大提高了SDS聚丙烯酰胺凝膠的分辨率。 廣泛使用的不連續(xù)緩沖系統(tǒng)早是由Ornsstein（1964）和Davis（1964）設(shè)計的，樣品和積層膠中含Tris-Cl（pH6.8），上下槽緩沖液含Tris-甘氨酸（pH8.3），分離膠中含Tris-Cl（pH8.8）的。系統(tǒng)中所有組分都含有0.1％的SDS（Laemmli, 1970），樣品和積層膠中的氯離干形成移動界面的先導(dǎo)邊界而甘氨酸分子則組成尾隨邊界，在移動界面的兩邊界之間是一電導(dǎo)較低而電位滴度較陡的區(qū)域，它推動樣品中的多肽前移并在分離膠前沿積聚，此處pH值較高，有利于甘氨酸的離子化，所形成的甘氨酸離子穿過堆集的多肽并緊隨氯離子之后，沿分離膠泳動。從移動界面中解脫后，SDS多肽復(fù)合物成一電位和pH值均勻的區(qū)帶泳動穿過分離膠，并被篩分而依各自的大小得到分離。
WB 普通蛋白
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- 更新時間2023/10/30 14:58:25
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伊萊博生物科技（上海）有限公司（簡稱，伊萊博生物），總部位于上海市長江軟件園，2024年1月與上海大學(xué)醫(yī)學(xué)院成立聯(lián)合研究中心，是一家以生命科學(xué)研究為基礎(chǔ)，專注于研究成果轉(zhuǎn)化及技術(shù)服務(wù)的創(chuàng)新型高科技企業(yè)。主要致力于為科研人員及機(jī)構(gòu)提供專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊和實驗平臺，建立包含腫瘤生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)和動物實驗等學(xué)科的研究服務(wù)體系。
伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗，具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米，擁有的儀器設(shè)備、細(xì)胞庫、樣本保存庫等。動物實驗中心近1800平方米，可滿足同時飼養(yǎng)清潔級和SPF級動物。核心實驗技術(shù)團(tuán)隊主要來自中國科學(xué)院大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)等重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu)，能夠為客戶提供研究方案策劃、項目實施及項目深度分析等方面的技術(shù)支持。公司目前參與研究項目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內(nèi)分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域。
為了響應(yīng)大力發(fā)展基礎(chǔ)研究的號召，推動生命科學(xué)領(lǐng)域的進(jìn)步，伊萊博生物充分利用積累多年的科研資源優(yōu)勢，提供培訓(xùn)服務(wù)。通過實驗理論培訓(xùn)和實踐相結(jié)合，充分了解科學(xué)研究和實驗操作的全過程，培訓(xùn)規(guī)范的實驗操作、分析問題和解決問題的能力，分層次培養(yǎng)科研人才，為其今后的科研工作奠定堅實的基礎(chǔ)。
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