細(xì)胞電融合/電穿孔儀ECM2001是一臺萬能的細(xì)胞操作儀器，它綜合了電穿孔儀和電融合儀的特點，ECM2001在細(xì)胞融合時，分三個階段，預(yù)融合、融合、后融合階段．ECM2001在預(yù)融合時可產(chǎn)生一種*的高頻交流波，交流波將細(xì)胞排列成雙體或株璉，以便融合的進(jìn)行，提高了融合的效率。
融合階段：交流波和直流波的轉(zhuǎn)換之間設(shè)有微秒開關(guān)，能在極短時間內(nèi)從交流電轉(zhuǎn)成直流電。在方波長電波的作用下，使細(xì)胞高效融合，融合完成：ECM2001立即產(chǎn)生了低電壓的交流波可使已初步融合的細(xì)胞聚集在一起，完成細(xì)胞圓體程序。
當(dāng)轉(zhuǎn)基因向?qū)Я餍枰^高的電壓和較長的脈沖時，直流方波長脈沖可單獨使用，完成轉(zhuǎn)基因。
細(xì)胞電融合/電穿孔儀技術(shù)參數(shù)
交流參數(shù)：*非正弦波形
頻率：1MHZ
電壓：0-75V
持續(xù)時間：0-99秒
直流參數(shù)：方波型
高壓模式：10-3000V/10 V調(diào)進(jìn) --用于電穿孔及轉(zhuǎn)基因；
脈沖次數(shù)：1-99次
應(yīng)用舉例
• 胚胎操作/核移植/動物克隆 （系統(tǒng)：ECM2001/830）
核移植是將細(xì)胞核從供體轉(zhuǎn)入受體的過程。細(xì)胞核指導(dǎo)胚胎的發(fā)育，導(dǎo)致新生體安全出生?；罴?xì)胞分裂，形成胚胎。Meng等人（1997）將核移植技術(shù)擴(kuò)展至靈長類動物模型，克隆出恒河猴。技術(shù)的進(jìn)步使研究人員能夠從分裂球進(jìn)展至更高分化的胚胎細(xì)胞以及靜止的胚兒細(xì)胞，作為核的供應(yīng)來源。胚胎產(chǎn)生的細(xì)胞在體外培養(yǎng)6-13代，然后在轉(zhuǎn)入前使用血清饑餓的方法使細(xì)胞靜止。如前文所述，Roble、Cibelli以及Stice是第一次在1998年報告使用非老化胚成纖維細(xì)胞作為核的供體進(jìn)行核移植而產(chǎn)生綿羊克隆轉(zhuǎn)基因牛的人。IanWilmut在1996年震驚了整個世界，他從成年乳腺的細(xì)胞產(chǎn)生出第一個動物克隆——多利。使用分化的成年細(xì)胞進(jìn)行克隆的能力打開了核移植廣泛運用的大門即基因治療的令人激動的模式。最近的成功事例PPLTherapeutics公司從成年體細(xì)胞克隆出豬。對于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合樣品池及微型載玻片。
• 動物細(xì)胞融合 （系統(tǒng)：ECM2001）
腫瘤及樹突的電融合目前在過繼性免疫療法中進(jìn)行使用。腫瘤細(xì)胞本身不能作為良好的抗原提成細(xì)胞，因此不會刺激T細(xì)胞生長。樹突細(xì)胞是已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的*抗原提呈細(xì)胞，在融合后可以將腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)變成抗原提呈細(xì)胞。刺激后比未融合腫瘤細(xì)胞至少增加100倍。對于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合附件及微型載玻片。
• 雜交瘤/細(xì)胞雜交瘤技術(shù) （系統(tǒng)：ECM2001）
在過去十年中，使用電融合技術(shù)進(jìn)行雜交瘤的產(chǎn)生及抗體大大增加。電融合的過程可以通過顯微鏡進(jìn)行觀察，與PEG相比需要的細(xì)胞數(shù)量較少。使用電融合用于這種用途還有無毒性及高效性的優(yōu)點。
Panova等人（1995）通過把人類B細(xì)胞與Heteromyeloma、Spam-8細(xì)胞進(jìn)行電融合增強(qiáng)了人類雜交瘤的生成。Kreutz等人（1998）引入了一種使用電融合及FACS分選的新方法產(chǎn)生細(xì)胞雜交瘤。Cao等人（1995）建立了另一種快速非選擇性方法通過電融合產(chǎn)生人類細(xì)胞雜交瘤。數(shù)據(jù)明確支持電融合用于這種重要目的的有效性。對于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合附件及微型載玻片。
• 植物原生質(zhì)的融合 （系統(tǒng)：ECM2001）
電融合可被用于融合植物原生質(zhì)以產(chǎn)生雜交體及創(chuàng)造具有所需特性的作物。Hofmann-Tsay等人（1994）試驗了可以的融合促進(jìn)物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)一些多聚物可以便利融合過程而不影響細(xì)胞新生。Chen等人（1995）將原生質(zhì)從2種種屬的Porphyria進(jìn)行融合，成功率高達(dá)85%。這些鼓舞人心的數(shù)生質(zhì)從2種種屬的Porphyria進(jìn)行融合，成功率高達(dá)85%。這些鼓舞人心的數(shù)據(jù)提示電融合與傳統(tǒng)的PEG融合方法相比，可以改善融合效率以及可重復(fù)性。對于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合附件及微型載玻片。
