特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱：土壤多酚氧化酶（SPPO）測試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
檢測方法：微量法
產(chǎn)品貨號：BK-01S6820
產(chǎn)品分類：土壤系列
商品介紹：
測定意義: S-PPO主要來源于土壤微生物、植物根系分泌物及動植物殘體分解釋放，催化土壤中芳香族化合物氧化成醌，醌與土壤中蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、礦物等物質(zhì)反應(yīng)生成有機質(zhì)和色素，完成土壤芳香族化合物循環(huán)，用于土壤環(huán)境修復(fù)。 測定原理： S-PPO能夠催化鄰苯三酚產(chǎn)生紫色物質(zhì)，后者在430nm有特征光吸收。 自備用品： 可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、25mL（不允許快遞）、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
2 ug PT2/RMCE-puDTK PT2/RMCE-puDTK 低溫運輸，-20℃保存
李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ) Listeria Enrichment Broth Base 250g
5u 氧化 Xanthine Oxidase 4℃保存
50T 轉(zhuǎn)基因植物TETR基因PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
50 T 肽一還原測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
250mL Maleate Buffer（馬來酸緩沖液）,0.2M,pH6.5 Maleate Buffer,0.2M,pH6.5 常溫保存
25OD G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物 RNA Cap Structure Analogs -20℃保存
2 ug pLVX-EF1α-mCherry-C1 pLVX-EF1α-mCherry-C1 低溫運輸，-20℃保存
改良GAM瓊脂 GAM Agar,Modified 250g
2 ug pKD3 pKD3 低溫運輸，-20℃保存
匹克氏肉湯基礎(chǔ)A Pick’s Broth BaseA 100g
土壤多酚氧化酶（SPPO）測試盒微量法Phospho-DBC1 (Thr454) 磷酸化膀胱缺失基因1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Bone Sialoprotein/BSP 骨涎蛋白 0.1ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/APC APC標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1ml
GRP75 G蛋白偶聯(lián)受體75抗體 規(guī)格: 0.2ml
CACNA1A/Cav2.1 電壓依賴性鈣通道Cav2.1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgM 羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 1mg
Gab1 接蛋白Gab 1抗體 規(guī)格: 0.1ml
PEN2 早老素γ分泌2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml
TGF alpha 轉(zhuǎn)移生因子α抗體 規(guī)格: 0.1ml
ATAD3A/B/C 三磷酸苷家族蛋白3A抗體 規(guī)格: 0.2ml
GAS2L1 生停滯特異性蛋白2家族1抗體 規(guī)格: 0.2ml
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時間不夠，可以延長反應(yīng)時間（反應(yīng)時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
