儀器組成及性能:
Q Exactive LC-MS/MS系統(tǒng),屬于四級桿-orbitrap串聯(lián)的高分辨質(zhì)譜,將高性能四極桿的母離子選擇性與Orbitrap的高分辨,高質(zhì)量精度相結(jié)合,具有快速掃描和多重檢測能力,不僅具有大范圍的篩選能力,而且尤為擅長目標(biāo)定量實(shí)驗(yàn)。其配有ESI源、APCI源和納噴源三種離子源。
液相系統(tǒng)配有Easy-nLC1000納流液相色譜和Ultimate 3000HPLC系統(tǒng)。EASY-nLC 1000系統(tǒng)具有在超高壓條件下分離生物分子(比如蛋白質(zhì)和多肽)的*性能。可與質(zhì)譜系統(tǒng)無縫連接以直接執(zhí)行安全可靠的檢測。更高的操作壓力范圍(0-1000bar)顯著縮短了分析周期,其設(shè)計(jì)旨在通過加速上樣和柱重新平衡的過程提高分析效率。另外,即使面臨非常復(fù)雜的樣品,新系統(tǒng)的不分流納升級功能也能提供出色的保留時(shí)間重復(fù)性(RSD小于0.4%)。簡明的一體化配置方便而耐用。Ultimate 3000HPLC系統(tǒng)壓力可達(dá)到9000psi,可以初步適應(yīng)超高壓液相色譜的要求。
母離子選擇性;(6)高能HCD裂解產(chǎn)生二級碎片離子; (7) 4-5數(shù)量級動(dòng)態(tài)范圍;(8)兼容UPLC;(9)每個(gè)色譜峰保證至少11-15個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn):(10)臺(tái)式,體積小巧。Q Exactive質(zhì)譜系統(tǒng)配備的S-透鏡組件采用步進(jìn)RF電壓,可選擇不同的質(zhì)量范圍;質(zhì)量范圍由幾個(gè)S-lens電壓決定;降低了離子注入時(shí)間的2-3倍;使得離子傳輸效率提高了5-10倍。
這款系統(tǒng)的核心價(jià)值:具有的定量能力,特異性強(qiáng),靈敏度高,線性范圍較寬,快速正負(fù)切換,正負(fù)切換定量時(shí)仍能保證較高的 分辨率。通過高分辨率測定精確質(zhì)量數(shù)進(jìn)行化合物定性,超高分辨率 R=140,000(200Da),具有優(yōu)異的質(zhì)量穩(wěn)定性。非常適合于未知物的掃描和定量;不需要搜集很多的標(biāo)準(zhǔn)品就可進(jìn)行方法優(yōu)化。具有分辨率更高,質(zhì)量穩(wěn)定性更好,復(fù)雜基質(zhì)中分析的靈敏度更高,速度快、能減少前處理等優(yōu)勢,適合食品安全,環(huán)境監(jiān)測,藥物研發(fā),各種組學(xué)等諸多領(lǐng)域的應(yīng)用。
相比QQQ的分析方法,Q-Exactive分析已知目標(biāo)化合物的優(yōu)點(diǎn)包括:(1)高分辨全掃描定量,無需方法優(yōu)化;(2)一針分析的目標(biāo)組分?jǐn)?shù)目沒有限制;(3)精確質(zhì)量數(shù)加二級全譜確證;(4)靈敏度=QQQ;(5)線性范圍達(dá)4-5個(gè)數(shù)量級。
應(yīng)用范圍:
1.蛋白質(zhì)組學(xué)方面:
a.可結(jié)合免疫共沉淀技術(shù)對特定蛋白通路中其他可能參與調(diào)控的未知蛋白進(jìn)行推測鑒定。
b.可用于對亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)或細(xì)胞、組織、及血液、尿液等進(jìn)行蛋白組學(xué)的研究,通過與正常樣品的對比,尋找并鑒定出差異蛋白,從而推測分析整體蛋白表達(dá)水平差異的調(diào)控機(jī)制。
c.可用于蛋白翻譯后修飾的研究,推測蛋白翻譯后修飾的種類和位點(diǎn)。
優(yōu)勢:可在單次實(shí)驗(yàn)中鑒定更多*的蛋白質(zhì),能進(jìn)行準(zhǔn)確的完整蛋白分析,快速定量低豐度等質(zhì)量標(biāo)記的肽段??稍诟鞣N復(fù)雜基質(zhì)下,完成對有機(jī)物高分辨率、高精度的鑒定。
2. 代謝組學(xué)方面:
a. 人體代謝物(血液、尿液、唾液或特定組織器官)與正常樣本對比的整體差異性代謝水平研究,可用于疾病的早期診斷(腫瘤標(biāo)志物的篩查)等。
b. 藥代動(dòng)力學(xué)研究:對藥物代謝過程的ADME環(huán)節(jié)中的代謝物進(jìn)行定性和定量分析。
c. 特定代謝途徑的調(diào)控分析,具有定性未知代謝物和同時(shí)精確定量的能力
3. 對藥物生產(chǎn)過程中的中間體或雜質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。
4. 可對環(huán)境或食品中的痕量有機(jī)毒素進(jìn)行定性和定量檢測。
5. 可對中藥材或中藥復(fù)方的復(fù)雜組分進(jìn)行快速的定性、定量分析,便于進(jìn)行質(zhì)量控制。