Live或Dead 可固定死細胞染色試劑盒 NIR熒光是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的染色細胞的試劑盒，我們的Live or Dead™ Fixable Dead Cell Staining Kit *NIR Fluorescence*是一套用于標記細胞的工具，用于細胞功能的熒光顯微鏡研究。細胞的有效標記為在空間和時間背景下研究細胞事件提供了有利的方法。這個特殊的試劑盒設(shè)計用紅外熒光均勻標記固定的哺乳動物細胞，用于紅色激光激發(fā)的流式細胞儀應(yīng)用。 該試劑盒使用專有的紅色熒光染料，在與細胞成分結(jié)合后更加熒光。 試劑盒中使用的熒光染料被激發(fā)，其中紅色（635nm）在775nm處具有熒光（APC / CY7通道）。 該試劑盒提供所有必需組件和優(yōu)化的細胞標記協(xié)議。 它是保存特定細胞熒光圖像的優(yōu)秀工具，也可用于熒光流式細胞儀應(yīng)用。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供的Live或Dead 可固定死細胞染色試劑盒 。
染色樣品示例
概述
1.用HHBS制備樣品（0.5 mL /分析）
2.替換為HHBS
3.將Stain It™NIR熒光添加到細胞懸浮液中
4.在室溫或37°C下染色細胞20-60分鐘
5.洗凈細胞
6.固定細胞（可選）
7.使用適當?shù)募ぐl(fā)/發(fā)射濾光片，用流式細胞儀和/或熒光顯微鏡檢查樣品
注意：在開始實驗之前，在室溫下解凍所有組分
操作步驟
表1.用于流式細胞術(shù)分析的熒光光譜特性和激發(fā)光
| 貨號 | 描述 | Ex(nm) | Em(nm) | 激發(fā)光源（nm） |
| 22500 | 藍色熒光，405nm激發(fā) | 410 | 450 | 405 |
| 22501 | 綠色熒光，405nm激發(fā) | 408 | 512 | 405 |
| 22502 | 橙色熒光，405nm激發(fā) | 398 | 550 | 405 |
| 22599 | 紅色熒光優(yōu)化用于流式細胞術(shù) | 523 | 617 | 488 |
| 22600 | 藍色熒光 | 353 | 442 | 335 |
| 22601 | 綠色熒光 | 498 | 521 | 488 |
| 22602 | 橙色熒光 | 547 | 573 | 561或488 |
| 22603 | 紅色熒光 | 583 | 603 | 561 |
| 22604 | 深紅色熒光 | 649 | 660 | 633 |
| 22605 | 近紅外熒光 | 749 | 775 | 633 |
1.使用1X Hanks和20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或您選擇的無疊D化鈉和無血清/蛋白質(zhì)的緩沖液制備細胞。
2.用HHBS或您選擇的無疊氮化物和無血清/蛋白質(zhì)的緩沖液洗滌細胞一次。
3.以5-10×106 / mL的濃度在HHBS或您選擇的無疊氮化物和無血清/蛋白質(zhì)的緩沖液中重懸細胞。
4.將1 µL 500X Stain It NIR熒光儲備液添加到0.5 mL細胞/測定中，并充分混合。
5.在室溫或37°C，5％CO2的培養(yǎng)箱中避光保存20-60分鐘。 注意：應(yīng)根據(jù)不同細胞系實驗確定的染色濃度和孵育時間。
6.洗滌細胞兩次，然后用HHBS或您選擇的緩沖液重懸細胞。
7.根據(jù)需要固定細胞（可選）。
8.使用適當?shù)募ぐl(fā)/發(fā)射濾光片，使用流式細胞儀和/或熒光顯微鏡分析細胞（參見表1）。
