我們的哺乳動物表達系統(tǒng)產(chǎn)生了重組人轉(zhuǎn)化生長因子β1,并表達了編碼Leu30-Arg278(Cys33Ser)的靶基因。
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稱為:轉(zhuǎn)化生長因子β-1;TGF-β-1;潛伏期相關肽;大腿部TGFB1;轉(zhuǎn)化生長因子B
制劑(制定)
從0.2μm的PBS過濾溶液中冷凍干燥,pH值7.4。
質(zhì)量控制(質(zhì)量控制)
純度:通過還原SDS-PAGE測定,純度大于95%。
內(nèi)毒素:通過LAL試驗測定,小于0.1納克/微克(1歐盟/微克)。
復溶(重組)
在打開管道之前,務必對管道進行離心分離。不要通過漩渦或移液管混合。
不建議將其重新配制成低于100μg/ml的濃度。
將凍干蛋白溶解在蒸餾水中。
請將重組溶液等分,以盡量減少凍融循環(huán)。
保存(儲存)
凍干蛋白質(zhì)應在<-20°C下儲存,但在室溫下應穩(wěn)定3周。
重組蛋白溶液可在4-7°C下儲存2-7天。
在<-20°C的溫度下,等分樣品在3個月內(nèi)保持穩(wěn)定。
背景(背景)
轉(zhuǎn)化生長因子β-1(transforminggrowthfactorβ-1,TGFβ-1)是一種分泌性蛋白,屬于TGFβ家族。TGFβ-1在骨、關節(jié)軟骨和軟骨細胞中大量表達,在骨關節(jié)炎(OA)中表達增加。TGFβ-1具有多種細胞功能,包括控制細胞生長、細胞增殖、細胞分化和凋亡。前體被切割成潛伏期相關肽(LAP)和成熟TGFβ-1肽。LAP和TGFβ1的二硫鍵連接同源二聚體在分泌后保持非共價結(jié)合,形成小的潛伏期TGFβ1復合物。純化的LAP還能夠以高親和力與活性TGF-β結(jié)合,并且能夠中和TGF-β活性。LAP與三種潛在TGF-β結(jié)合蛋白(LTBPs)之一的共價連接產(chǎn)生了一種可能與細胞外基質(zhì)相互作用的大型潛在復合物。TGF-β從潛伏期的激活在空間和時間上受多種途徑的控制,這些途徑包括蛋白酶(如纖溶酶和MMP9)的作用和/或ningxuemei反應蛋白1或選定的整合素。盡管TGF-β的不同亞型與它們自己的不同LAP自然相關,但TGF-β1 LAP能夠與所有其他人類TGF-β亞型和大多數(shù)其他物種的TGF-β亞型絡合并使其失活。LAP內(nèi)的突變與Camura-Engelmann病有關,這是一種罕見的硬化性骨發(fā)育不良,其特征是活性TGF-β1的不適當存在。
電泳(SDS-PAGE)