無(wú)菌室也稱(chēng)接種室，是系統(tǒng)接種、純化菌種等無(wú)菌操作的專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)室。在微生物工作中，菌種的接種移植是一項(xiàng)主要操作，這項(xiàng)操作的特點(diǎn)就是要保證菌種純種，防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中，由于存在許多塵埃和雜菌，很易造成污染，對(duì)接種工作干擾很大。

　　1. 無(wú)菌室的設(shè)置

　　無(wú)菌室應(yīng)根據(jù)既經(jīng)濟(jì)又科學(xué)的原則來(lái)設(shè)置。其基本要求有以下幾點(diǎn)：

　　(1) 無(wú)菌室應(yīng)有內(nèi)、外兩間，內(nèi)間是無(wú)菌室，外間是緩沖室。房間容積不宜過(guò)大，以便于空氣滅菌。最小內(nèi)間面積2×2.5=5，外間面積1×2=2，高以2.5m以下為宜，都應(yīng)有天花板。

　　(2) 內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門(mén)，以減少空氣的波動(dòng)，門(mén)應(yīng)設(shè)在離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置上;外間的門(mén)也用拉門(mén)，要設(shè)在距內(nèi)間最遠(yuǎn)的位置上。

　　(3) 在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上，應(yīng)開(kāi)一個(gè)小窗，作接種過(guò)程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道，以減少人員進(jìn)出內(nèi)間的次數(shù)，降低污染程度。小窗寬1500px、高1000px、厚750px，內(nèi)外都掛對(duì)拉的窗扇。

　　(4) 無(wú)菌室容積小而嚴(yán)密，使用一段時(shí)間后，室內(nèi)溫度很高，故應(yīng)設(shè)置通氣窗。通氣窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門(mén)處的頂棚上(即離工作臺(tái)最遠(yuǎn)的位置)，為雙層結(jié)構(gòu)，外層為百葉窗，內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開(kāi)啟，以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機(jī)。

　　2. 無(wú)菌室內(nèi)設(shè)備和用具

　　(1) 無(wú)菌室內(nèi)的工作臺(tái)，不論是什么材質(zhì)、用途的，都要求表面光滑和臺(tái)面水平。

　　(2) 在內(nèi)室和外室各安裝一個(gè)紫外燈(多為30W)。內(nèi)室的紫外線(xiàn)燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方，離地面2m，外室的紫外線(xiàn)燈可安裝在外室。

　　(3) 外室應(yīng)有專(zhuān)用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來(lái)蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。

　　(4) 內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢物筐等。

3. 無(wú)菌室的滅菌消毒

　　(1) 薰蒸：這是無(wú)菌室*滅菌的措施。無(wú)菌室使用了較長(zhǎng)時(shí)間，污染比較嚴(yán)重時(shí)，應(yīng)進(jìn)行薰蒸滅菌?？捎眉兹?、乳酸或硫磺薰蒸。

　　(2) 噴霧：在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微塵飛場(chǎng)，并有殺菌作用?？捎?%石炭酸噴霧。

　　(3)紫外線(xiàn)照射：在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。紫外線(xiàn)有較好的殺菌效果。通常應(yīng)開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈照射30～60min。

　　4. 無(wú)菌室工作規(guī)程

　　(1) 無(wú)菌室滅菌。每次使用前開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈照射30min以上，或在使用前30min，對(duì)內(nèi)外室用5%石炭酸噴霧。

　　(2) 用肥皂洗手后，把所需器材搬入外室;在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋，戴好口罩，然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。

　　(3) 將各種需用物品搬進(jìn)內(nèi)室清點(diǎn)、就位，用5%石炭酸在工作臺(tái)面上方和操作員站位空間噴霧，返回外室，5～10min后再進(jìn)內(nèi)室工作。

　　(4) 接種操作前，用70%酒精棉球擦手;進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)，動(dòng)作要輕緩，盡量減少空氣波動(dòng)和地面揚(yáng)塵。

　　(5) 工作中應(yīng)注意安全。如遇棉塞著火，用手緊握或用濕布包裹熄滅，切勿用嘴吹，以免擴(kuò)大燃燒;如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時(shí)，應(yīng)用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布包裹后，并用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布擦拭臺(tái)面或地面，用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。

　　(6) 工作結(jié)束，立即將臺(tái)面收拾干凈，將不應(yīng)在無(wú)菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無(wú)菌室后，對(duì)無(wú)菌室用5%石炭酸噴霧，或開(kāi)紫外線(xiàn)燈照射30min。

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