公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
中文名稱：MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒
英文名稱：MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格：500次
產(chǎn)品貨號(hào)：LZ-01X6321
發(fā)貨周期：1～3天
商品介紹：
| MTS是一種新型甲臜化合物，和MTT同屬四唑氮衍生物。MTS能被活細(xì)胞里的線粒體脫氫酶降解而產(chǎn)生棕黃色水溶性的甲臜，通過測(cè)定甲臜的光譜吸收，進(jìn)而可以測(cè)定細(xì)胞的增殖情況。 產(chǎn)品特點(diǎn)： 1．本試劑盒是單溶液式細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑，主要成分包含MTS和一個(gè)電子耦合試劑，溶液的穩(wěn)定性強(qiáng)，反應(yīng)的靈敏度高。 2．操作簡(jiǎn)便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí)，無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞，免去溶解步驟。 3．無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物，也不需要處理廢棄物。 4．與MTT相比，使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。 5．操作靈活，與MTT不同，平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育，使顏色進(jìn)一步生成。 儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸，-20℃避光保存，有效期半年。 使用效果： 96孔板中加入細(xì)胞100μL/孔(約1×104)，37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí)，加入適當(dāng)濃度的受試化合物。培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間，每孔中加入10μL的MTS細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液。37℃孵育1-4小時(shí)。490nm波長(zhǎng)檢測(cè)光密度。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/p>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCGF)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B細(xì)胞受體(BCR)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人B因子(BF)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(紅色熒光)
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(顯色法)
Caspase 1 活性檢測(cè)試劑盒
Caspase 2 活性檢測(cè)試劑盒
Caspase 3 活性檢測(cè)試劑盒
Caspase 4 活性檢測(cè)試劑盒
Caspase 6 活性檢測(cè)試劑盒
Caspase 8 活性檢測(cè)試劑盒
Caspase 9 活性檢測(cè)試劑盒
Caspase抑制劑(Z-VAD-FMK)
Caspase 3抑制劑(Ac-DEVD-CHO)
線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒
羅丹明123
CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)
Ad-GFP-LC3B
Ad-mCherry-GFP-LC3B
DAPI溶液(5mg/ml)
DAPI染色液
Hoechst 33258細(xì)胞藍(lán)色熒光染料
MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒Hoechst 33258染色液
Hoechst 33342細(xì)胞藍(lán)色熒光染料
Hoechst 33342染色液
活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
注意事項(xiàng)：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
