細胞培養(yǎng)操作 | ||||
收貨方式 | T25瓶 | 凍存管 | ||
初步平衡 | 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,放37度培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4h,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài) | 無須平衡,直接放入-80冰箱(不超過一周)或者液氮罐保存,建議盡早復蘇 | ||
傳代密度 | 細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng) | 第二天換液并檢查細胞密度 | ||
傳代比例 | 傳代建議1:2傳代 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 | 一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 | ||
傳代方法 | a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,棄去消化液,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3 min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 c、按6-8 mL/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心4 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。 d、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 | 將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 | ||
注意事項 | 1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 2.因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。 | 1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存; 2.為保證細胞的高存活率,收到產品后,請立即解凍復蘇細胞。 | ||
到貨須知 | 1.收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否*揮發(fā),細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 2.靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。 3.由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。 4.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。 | |||
備注:客戶在細胞培養(yǎng)過程中,有任何技術問題我們隨時給予解答。 | ||||
細胞凍存操作 | ||||
凍存液配方 | 無血清凍存液,液氮儲存 | |||
細胞密度 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例 | |||
凍存方法 | a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細胞,進行細胞計數(shù)。 b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 | |||
注意事項 | 凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案 |
廈門逸漠生物科技有限公司(Xiamen Immocell Biotechnology Co.,Ltd.)坐落于廈門國家留學創(chuàng)業(yè)園(翔安)產業(yè)園,是一家專注于細胞生物學領域新產品、新技術開發(fā)。公司產品涵蓋:細胞系、原代細胞、標記細胞、耐藥細胞、免疫細胞及胎牛血清、培養(yǎng)基、雙抗、無血清冷凍液、支原體/黑膠蟲清除劑、細胞因子等產品,提供細胞形態(tài)和免疫相關檢測、流式細胞檢測 、細胞學服務、分子生物學檢測等多種技術服務。
逸漠生物(IMMOCELL)擁有一支具有深厚造詣和豐富經驗的技術人才,建設了高規(guī)格的研發(fā)實驗室與生產車間,建立了規(guī)范的研發(fā)、生產、銷售、客服管理體系。公司與國內外多家醫(yī)院、高等院校、科研院所、生物醫(yī)藥公司建立了良好的合作關系,贏得了良好的市場聲譽和廣泛的客戶認可,努力成為生命科學界可靠的合作伙伴和堅強的技術后盾。
細胞系,原代細胞,標記細胞,耐藥細胞,免疫細胞及胎牛血清,培養(yǎng)基,雙抗,無血清冷凍液,支原體/黑膠蟲清除劑,細胞因子等
形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長 | 規(guī)格:1×106cells/T25或1mL凍存管 |
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細胞名稱H9C2(2-1)大鼠心肌細胞
細胞別稱H9c2 (2-1); H9c2; H9C2;大鼠心肌細胞系
種屬來源大鼠
年齡性別胚胎
組織來源心臟,心肌層
生長特性貼壁生長
細胞形態(tài)成肌細胞
細胞代數(shù)10代以內
背景介紹H9c2(2-1)細胞是一株由Kimes·B和Brandt·B從BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細胞株亞克隆得到的細胞株;H9c2(2-1)細胞
H9C2大鼠心肌細胞(種屬鑒定正確) 產品信息