本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷
人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒
使用說明書
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被的XX抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的所測樣本指標正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品活性/含量。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒
試劑盒組成
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
標準品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
| 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、25、50、100、200、400 U/L(濃度可定制,靈敏度可調(diào)整)
試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加40μL(即樣本稀釋5倍);空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
結(jié)果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
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人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒 |
人髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒 |
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人補體4(C4)ELISA試劑盒 |
人補體3(C3)ELISA試劑盒 |
人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒 |
人環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒 |
人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 |
人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 |
人胰島素原(PI)ELISA試劑盒 |
人碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒 |
人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 |
人抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒 |
人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒 |
人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒 |
人類風濕因子(RF)ELISA試劑盒 |
人抗鏈球菌溶血素O/抗O(ASO)ELISA試劑盒 |
人免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 |
人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒 |
人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒 |
人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒 |
人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA試劑盒 |
人內(nèi)嗎啡肽-2(EM-2)ELISA試劑盒 |
人α-內(nèi)嗎啡肽(α-EP)ELISA試劑盒 |
人β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 |
人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 |
人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒 |
人多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒 |
人腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒 |
人異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒 |
人雄激素受體(AR)ELISA試劑盒 |
人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒 |
人免疫反應性生長激素(irGH)ELISA試劑盒 |
人長效甲狀腺刺激素(LATS)ELISA試劑盒 |
人雌激素受體(ER)ELISA試劑盒 |
人超敏生長激素(U S-GH)ELISA試劑盒 |
人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒 |
人氫化可的松(HYD)ELISA試劑盒 |
人阿立新A(Orexin A)ELISA試劑盒 |
人黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒 |
人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 |
人腎素(Renin)ELISA試劑盒 |
人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒 |
人雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒 |
人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒 |
人血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒 |
人血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒 |
人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒 |
人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 |
人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒 |
人甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒 |
人抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 |
人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒 |
人脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒 |
人脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒 |
人生長抑素(SS)ELISA試劑盒 |
人生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 |
人脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA試劑盒 |
人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒 |
人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒 |
人伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒 |
人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒 |
人胎盤催乳素(HPL)ELISA試劑盒 |
人胎盤泌乳素(PL)ELISA試劑盒 |
人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒 |
人催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒 |
人妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 |
人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 |
人鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒 |
人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒 |
人膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒 |
人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒 |
人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒 |
人骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒 |
人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)ELISA試劑盒 |
人鈣調(diào)磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒 |
人骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試劑盒 |
人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒 |
人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒 |
人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒 |
人骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒 |
人骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒 |
人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISA試劑盒 |
人骨保護素配體(OPGL)ELISA試劑盒 |
人骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒 |
人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 |
人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒 |
人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 |
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒 |
人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒 |
人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 |
人P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒 |
人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒 |
人橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α)ELISA試劑盒 |
人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 |
人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 |
人骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒 |
人降鈣素(CT)ELISA試劑盒 |
人骨鈣素(BGP;OCN)ELISA試劑盒 |
人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒 |
人髓系細胞觸發(fā)受體1(TREM-1)ELISA試劑盒 |
人骨保護素(OPG)ELISA試劑盒 |
人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒 |
人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒 |
人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA試劑盒 |
人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒 |
人脾臟酪氨酸激酶(Syk)ELISA試劑盒 |
人白細胞介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA試劑盒 |
人尿激酶(UK)ELISA試劑盒 |
人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA試劑盒 |
人胰蛋白酶(trypsin)ELISA試劑盒 |
人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒 |
人磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒 |
人鏈激酶(SK)ELISA試劑盒 |
人丙酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒 |
人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒 |
人蛋白激酶C(PKC)ELISA試劑盒 |
人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒 |
人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒 |
人細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)ELISA試劑盒 |
人蛋白酪氨酸激酶(PTK/CD115)ELISA試劑盒 |
人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA試劑盒 |
人周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒 |
人受體酪氨酸激酶(RTKs)ELISA試劑盒 |