工作原理
Port-a-Patch全自動膜片鉗是新一代細(xì)胞膜離子通道信息測量系統(tǒng)。該系統(tǒng)通過平板芯片電極(芯片上約1-2μm的小孔)作為記錄離子通道電流的工具,用戶可將一定密度的細(xì)胞懸液滴加在芯片電極上,細(xì)胞液會隨機下降,并在負(fù)壓控制器的吸引下形成高阻封接;然后通過細(xì)胞外液自動灌流系統(tǒng)(配件),由電腦控制自動完成細(xì)胞的封接、破膜、藥物灌流處理和電信號的記錄,以觀察細(xì)胞膜離子通道的變化并進(jìn)行藥學(xué)實驗。另外,溫度控制儀(配件)可控制系統(tǒng)內(nèi)部溫度以保障細(xì)胞活性,顯微成像配件,可向用戶提供顯微放大系統(tǒng)的接口。該系統(tǒng)由于采用了自動化技術(shù)手段,將傳統(tǒng)的操作過程大大簡化,免除了人工操作的繁瑣,節(jié)省了大量時間,實驗成功率可得到大幅度提高。
功能及用途
用于測量動物、植物細(xì)胞或蛋白上離子通道的電流變化情況。主要應(yīng)用于動物細(xì)胞上離子通道變化規(guī)律的研究。如:用于研究動物細(xì)胞(如HEK293、CHO、神經(jīng)細(xì)胞等)等在各種抑制劑或阻斷劑處理下的影響,細(xì)胞內(nèi)部的調(diào)整變化機制研究。
特點和優(yōu)勢
1 操作非常簡單。全過程可自動化,不用培訓(xùn)專人負(fù)責(zé)操作,極大的降低了膜片鉗在使用上的高技術(shù)門檻
2 實驗迅速,通量高。一般每天可達(dá)到50個實驗數(shù)據(jù)左右。
3 藥液交換迅速。細(xì)胞內(nèi)、外液的交換是在平面芯片上進(jìn)行,所以藥液交換非常迅速,作用時間快,外灌流時間常數(shù):~200ms內(nèi)灌流時間常數(shù):~2s。非常適合配體 門控通道實驗。而且在單位時間內(nèi)增加實驗的重復(fù)次數(shù),提高了實驗數(shù)據(jù)的質(zhì)量
4 藥物消耗極低。每次更換的外液僅需十幾微升。
5 信號準(zhǔn)確,噪聲少。使用了*的微型“法拉第板”替代傳統(tǒng)的“法拉第籠”,極大的減少了噪聲源,記錄數(shù)據(jù)的電噪音很低(小于300fA/500 MΩ)。
6 擴展功能多。配套擴展設(shè)備豐富,如內(nèi)灌流系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、脂質(zhì)體制備器等等。
7 安裝簡單。由于它全新的設(shè)計模式,所有設(shè)備僅包括芯片封接盒(內(nèi)含整合放大器)、負(fù)壓吸引控制盒和放大器,安裝非常簡單,不需要防震工作臺、顯微鏡、法 拉第籠和顯微操作儀等傳統(tǒng)膜片鉗系統(tǒng)必需的輔助系統(tǒng)。
8 軟件強大。軟件的功能全面,可按照操作者設(shè)定的參數(shù)方案自動執(zhí)行實驗,進(jìn)行細(xì)胞吸附、封接和維持全細(xì)胞記錄模式;并兼容常規(guī)膜片鉗放大器,如HEKA EPC-? 10,Axon Axopatch 200A/B 等。