第三代免疫分析技術(shù),多因子檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn),電化學(xué)發(fā)光原理,可應(yīng)用于細(xì)胞因子、信號(hào)通路磷酸化蛋白、疾病biomarker檢測(cè),可應(yīng)用于藥物篩選、PK研究、免疫原性檢測(cè)、毒理評(píng)估、抗體藥親和力篩選等。
MSD
蛋白分析實(shí)驗(yàn)技術(shù)1、MSD超敏電化學(xué)發(fā)光平臺(tái)
針對(duì)550位北美和歐洲的高級(jí)生物醫(yī)藥研究人員的報(bào)告中顯示,基于電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的MSD(MesoScale Discovery)是受歡迎的5大免疫分析品牌之一。可將Western Blot從16小時(shí)縮短至4.5小時(shí)。
基本原理:
電化學(xué)發(fā)光是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng),是電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個(gè)過(guò)程的結(jié)合。MSD電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)使用SULFO-TAGTM標(biāo)記物,在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的電極表面通電后,電化學(xué)作用激發(fā)SULFO-TAGTM標(biāo)記物發(fā)出強(qiáng)光。
MSD(Meso Scale Discovery)優(yōu)勢(shì):
1)更高靈敏度與更寬的線性范圍
MSD靈敏度可達(dá)0.05pg/ml,有效線性范圍達(dá)6log(從亞皮克級(jí)到幾萬(wàn)皮克),能同時(shí)兼顧高低豐度蛋白的檢測(cè)。傳統(tǒng) ELISA常規(guī)線性范圍在10pg/ml-1000pg/ml,采用Ultra-sensitivity試劑盒則為0.5-10pg/ml。(對(duì)比詳情見(jiàn)下圖)
2)樣本兼容度高,基質(zhì)效應(yīng)小
MSD平臺(tái)由于其的電化學(xué)發(fā)光原理,可將許多非特異信號(hào)予以排除,受樣本性質(zhì)的影響更小(如粘稠樣本,懸濁顆粒樣 本等),因此對(duì)于各類生物學(xué)樣本的兼容度高。目前測(cè)定樣本包括但不限于:血清,血漿,培養(yǎng)上清,細(xì)胞/組織裂解液,腦脊 液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物學(xué)樣本。
3)節(jié)省樣本用量,可實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè)
傳統(tǒng)ELISA每孔所需樣本量一般為50-100uloMSD通過(guò)點(diǎn)陣技術(shù),在96孔石墨電極板里,可實(shí)現(xiàn)每孔25卩L樣本,10個(gè)指標(biāo)的 檢測(cè),為珍貴樣本的研究提供了更多的數(shù)據(jù)。
4)實(shí)驗(yàn)流程簡(jiǎn)便、快速、多元化
MSD提供了更為便捷快速的實(shí)驗(yàn)流程,通常只需4-5小時(shí),即可完成整個(gè)檢測(cè)流程,簡(jiǎn)要步驟如下:
4.1V-PLEX
4.2 U-PLEX
5)信號(hào)穩(wěn)定且不受顯色順序影響
MSD由于基于電化學(xué)發(fā)光原理,信號(hào)分子SULFO-TAG需在電激發(fā)的情況下才能產(chǎn)生信號(hào),因此整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程無(wú)需避光,每 孔激發(fā)與信號(hào)采集時(shí)長(zhǎng)統(tǒng)一,避免了像ELISA底物與終止液加入順序先后所導(dǎo)致的數(shù)據(jù)差異,不受操作人員技術(shù)水平差異 的影響。請(qǐng)見(jiàn)下圖電化學(xué)發(fā)光平臺(tái)示意圖(見(jiàn)后頁(yè))
應(yīng)用范圍
結(jié)果展示
MSD開(kāi)發(fā)試驗(yàn)
項(xiàng)目
條件摸索
完成標(biāo)準(zhǔn)曲線摸索和樣本初步檢測(cè)
完成方法學(xué)檢測(cè)
包含內(nèi)容
A、捕獲抗體、檢測(cè)抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、二抗條件摸索
B、標(biāo)準(zhǔn)曲線摸索和初步樣本測(cè)試
C、方法學(xué)驗(yàn)證(整體重復(fù)3次)
