一、蛋白固液分離提取概述:
蛋白質(zhì)是包括人類在內(nèi)的各種生物有機(jī)體的重要組成成分,是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)之一。生物體的生長(zhǎng)、發(fā)育、遺傳和繁殖等一切生命活動(dòng)都離不開(kāi)蛋白質(zhì)。
分離純化某一特定蛋白質(zhì)的一般程序可以分為前處理、粗分離、細(xì)分離三步。
當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)提取液(有時(shí)還雜有核酸、多糖之類)獲得后,選用一套適當(dāng)?shù)姆椒?,將所要的蛋白與其他雜蛋白分離開(kāi)來(lái)。一般這一步的分離用鹽析、等電點(diǎn)沉淀和有機(jī)溶劑分級(jí)分離等方法。這些方法的特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、處理量大,既能除去大量雜質(zhì),又能濃縮蛋白溶液。有些蛋白提取液體積較大,又不適于用沉淀或鹽析法濃縮,則可采用超過(guò)濾、凝膠過(guò)濾、冷凍真空干燥或其他方法進(jìn)行濃縮。
樣品經(jīng)粗分級(jí)分離以后,一般體積較小,雜蛋白大部分已被除去。進(jìn)一步純化,一般使用層析法包括凝膠過(guò)濾、離子交換層析、吸附層析以及親和層析等。必要時(shí)還可選擇電泳法,包括區(qū)帶電泳、等電點(diǎn)聚焦等作為最后的純化步驟。用于細(xì)分級(jí)分離的方法一般規(guī)模較小,但分辨率很高。
結(jié)晶是蛋白質(zhì)分離純化的最后步驟。盡管結(jié)晶過(guò)程并不能保證蛋白一定是均一的,但是只有某種蛋白在溶液中數(shù)量上占有優(yōu)勢(shì)時(shí)才能形成結(jié)晶。結(jié)晶過(guò)程本身也伴隨著一定程度的純化,而重結(jié)晶又可除去少量夾雜的蛋白。由于結(jié)晶過(guò)程中從未發(fā)現(xiàn)過(guò)變性蛋白,因此蛋白的結(jié)晶不僅是純度的一個(gè)標(biāo)志,也是斷定制品處于天然狀態(tài)的有力指標(biāo)。
二、蛋白固液分離設(shè)備的原理:
蛋白固液分離-臥螺離心機(jī)是一種臥式螺旋卸料、連續(xù)操作的沉降設(shè)備。本類離心機(jī)工作原理為:轉(zhuǎn)鼓與螺旋以一定差速同向高速旋轉(zhuǎn),物料由進(jìn)料管連續(xù)引入輸料螺旋內(nèi)筒,加速后進(jìn)入轉(zhuǎn)鼓,在離心力場(chǎng)作用下,較重的固相物沉積在轉(zhuǎn)鼓壁上形成沉渣層。輸料螺旋將沉積的固相物連續(xù)不斷地推至轉(zhuǎn)鼓錐端,經(jīng)排渣口排出機(jī)外。較輕的液相物則形成內(nèi)層液環(huán),由轉(zhuǎn)鼓大端溢流口連續(xù)溢出轉(zhuǎn)鼓,經(jīng)排液口排出機(jī)外。本機(jī)能在全速運(yùn)轉(zhuǎn)下,連續(xù)進(jìn)料、分離、洗滌和卸料。具有結(jié)構(gòu)緊湊、連續(xù)操作、運(yùn)轉(zhuǎn)平穩(wěn)、適應(yīng)性強(qiáng)、生產(chǎn)能力大、維修方便等特點(diǎn)。適合分離含固相物粒度大于0.005mm,濃度范圍為2-40%的懸浮液。
三、蛋白固液分離設(shè)備的優(yōu)勢(shì):
1、 適應(yīng)性好:在工藝上充分考慮了物料、工藝對(duì)離心機(jī)提出的各種特殊要求,對(duì)主要部件實(shí)施了專用性、可調(diào)性方面的優(yōu)化設(shè)計(jì)。只要用戶在購(gòu)機(jī)前對(duì)其安裝使用的場(chǎng)所、物料處理的理化特性、工藝要求等進(jìn)行說(shuō)明,我們將會(huì)給用戶提供的機(jī)型。
2、 自動(dòng)化程度高:離心機(jī)在工作時(shí)的進(jìn)料、分離、卸料、等工序是在高速運(yùn)轉(zhuǎn)下連續(xù)自動(dòng)進(jìn)行的。采用可編程序控制器實(shí)現(xiàn)離心分離和離心沖洗過(guò)程的自動(dòng)控制。
3、運(yùn)行穩(wěn)定性好:離心機(jī)使用的差速器為擺線輪差速器或行星輪差速器,具有扭矩大、調(diào)節(jié)范圍廣等特點(diǎn)。