產(chǎn)品介紹
采用[Cutting-edge的圖像分析方法(區(qū)別于傳統(tǒng)的庫(kù)爾特計(jì)數(shù)原理,如Millipore的Scepter),計(jì)數(shù)結(jié)果[accuracy]、穩(wěn)定
多維自動(dòng)聚焦技術(shù)
哺乳動(dòng)物細(xì)胞總數(shù)及活細(xì)胞計(jì)數(shù)
一步操作,30秒內(nèi)實(shí)現(xiàn)真正的全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)
- 主要功能和優(yōu)點(diǎn)
◆ 適用于多種大小和類(lèi)型的細(xì)胞 — 計(jì)算細(xì)胞系、原代細(xì)胞(來(lái)自組織或血液)和干細(xì)胞的數(shù)量;
◆不斷研制的自動(dòng)聚焦技術(shù) — 避免因人工聚焦導(dǎo)致的差異,在 30 秒內(nèi)得出[accurate的細(xì)胞計(jì)數(shù);
◆細(xì)胞尺寸篩選功能 — 用戶(hù)在復(fù)雜的樣品(例如原代細(xì)胞)中選擇感興趣的群體,或者讓細(xì)胞計(jì)數(shù)算法執(zhí)行全部工作;
◆細(xì)胞活性 — 使用多焦點(diǎn)平面分析功能,[accuracy]分析細(xì)胞;
◆輕松歸檔和分析 — 內(nèi)置內(nèi)存中存儲(chǔ)多達(dá) 100 個(gè)計(jì)數(shù)結(jié)果,可隨時(shí)訪(fǎng)問(wèn),另可使用可選的 TC20 數(shù)據(jù)分析器軟件在 PC 上對(duì)導(dǎo)出的細(xì)胞圖像做進(jìn)一步分析;
您可以輕松、快速地獲取有關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)的全部數(shù)據(jù);利用 TC20 細(xì)胞計(jì)數(shù)器和一次性計(jì)數(shù)載玻片,可避免單調(diào)乏味的設(shè)置、清潔或維護(hù)工作。TC20 細(xì)胞計(jì)數(shù)器使用起來(lái)非常簡(jiǎn)便、直觀;
獲得可靠且可重復(fù)的結(jié)果加載 插入 查看結(jié)果
將樣品加載到載玻片上。 將載玻片插入 TC20 細(xì)胞計(jì)數(shù)器;計(jì)數(shù)自動(dòng)開(kāi)始。 在 30 秒內(nèi)獲取細(xì)胞總數(shù)(不使用臺(tái)盼藍(lán))或總細(xì)胞和活細(xì)胞計(jì)數(shù)(使用臺(tái)盼藍(lán))。
TC20 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器采用自動(dòng)聚焦顯微鏡,可分析多個(gè)焦點(diǎn)平面來(lái)確定理想中平面。此精密的細(xì)胞計(jì)數(shù)算法將使用從理想中焦點(diǎn)平面獲取的圖像來(lái)識(shí)別細(xì)胞并排除殘骸,從而 計(jì)算細(xì)胞總數(shù),無(wú)需用戶(hù)輸入任何信息。自動(dòng)聚焦功能使細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果具有高度的可重復(fù)性,與血球計(jì)和采用人工聚焦的細(xì)胞計(jì)數(shù)器相比,可減少用戶(hù)之間的測(cè)量差 異。在評(píng)估細(xì)胞活性時(shí),使用自動(dòng)聚焦代替具有主觀性的人工聚焦特別重要,因?yàn)槿绻x錯(cuò)了焦點(diǎn)平面,將導(dǎo)致不[accuracy]的結(jié)果。
與基于電阻抗(Coulter 原理)的細(xì)胞計(jì)數(shù)器不同,TC20 采用基于圖像的分析方法,允許用戶(hù)實(shí)時(shí)查看細(xì)胞,可通過(guò)目測(cè)證實(shí) TC20 細(xì)胞計(jì)數(shù)器已正確識(shí)別細(xì)胞。
TC20 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器提供的結(jié)果的[accuracy]性與血球計(jì)相當(dāng)。它可以計(jì)數(shù)直徑為 6–50 微米、濃度范圍為 5 x 104–1 x 107 個(gè)細(xì)胞/毫升的細(xì)胞;由于濃度范圍很大,因而不再需要稀釋細(xì)胞,有助于減少計(jì)數(shù)之前因稀釋樣品而產(chǎn)生的誤差。
此計(jì)數(shù)器采用一次性計(jì)數(shù)載玻片,這種載玻片具有的設(shè)計(jì),可確保細(xì)胞在計(jì)數(shù)池中均勻分布,而無(wú)論用戶(hù)采取何種液滴吸取方式,因而可得出[accuracy]、一致的細(xì)胞計(jì)數(shù)。
對(duì)于由多個(gè)細(xì)胞群體構(gòu)成的復(fù)雜樣品(例如原代細(xì)胞),用戶(hù)可調(diào)整細(xì)胞大小門(mén)限來(lái)定義將要計(jì)數(shù)的相關(guān)群體。在計(jì)數(shù)多個(gè)復(fù)制品時(shí),TC20 細(xì)胞計(jì)數(shù)器可保存細(xì)胞尺寸篩選的設(shè)置并將其應(yīng)用于后續(xù)計(jì)數(shù)。
細(xì)胞尺寸篩選 — 計(jì)算原代細(xì)胞和其他復(fù)雜樣品的數(shù)量
TC20™ 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器有兩種計(jì)數(shù)模式。根據(jù)樣品類(lèi)型,可啟用或禁用由用戶(hù)定義的尺寸篩選功能。
具有多個(gè)細(xì)胞群體的樣品(干細(xì)胞和其他原代細(xì)胞)
必須啟用由用戶(hù)定義的尺寸篩選功能。啟用由用戶(hù)定義的尺寸篩選功能后,將在每次計(jì)數(shù)開(kāi)始時(shí)顯示一個(gè)直方圖,用戶(hù)可通過(guò)調(diào)整細(xì)胞尺寸篩選的位置來(lái)選擇感興趣的群體。只有范圍內(nèi)的對(duì)象才會(huì)被作為細(xì)胞進(jìn)行分析;直徑超出尺寸范圍的對(duì)象將不在細(xì)胞計(jì)數(shù)之列。
如果禁用由用戶(hù)定義的尺寸篩選功能,細(xì)胞計(jì)數(shù)算法將自動(dòng)確定要計(jì)數(shù)的群體,而不需要用戶(hù)輸入任何信息。該算法將計(jì)數(shù)[much]主要的細(xì)胞類(lèi)型,這種細(xì)胞一般會(huì)構(gòu)成髙至的峰值,但可能不是用戶(hù)希望計(jì)數(shù)的群體。尺寸篩選設(shè)置窗口。 細(xì)胞尺寸篩選窗口。
為簡(jiǎn)化計(jì)數(shù)此類(lèi)樣品的工作,在計(jì)數(shù)多個(gè)復(fù)制品時(shí),TC20 細(xì)胞計(jì)數(shù)器可保存尺寸篩選設(shè)置并將其應(yīng)用于后續(xù)計(jì)數(shù)(在尺寸篩選設(shè)置窗口的“Use saved gates”(使用保存的尺寸)字段中選擇 Yes(是))。
如果“Image preview”(圖像預(yù)覽)設(shè)置為 On(打開(kāi)),將在設(shè)置篩選尺寸期間顯示細(xì)胞圖像。在此圖像中,只有直徑處于所選篩選尺寸之間的細(xì)胞才會(huì)使用黃點(diǎn)標(biāo)記。
永生細(xì)胞系
在計(jì)數(shù)永生細(xì)胞系或其他由類(lèi)似大小的細(xì)胞構(gòu)成的樣品時(shí),可禁用由用戶(hù)定義的尺寸篩選功能。這時(shí),細(xì)胞計(jì)數(shù)算法會(huì)自動(dòng)識(shí)別相關(guān)細(xì)胞群體,而不需要用戶(hù)輸入信息。
細(xì)胞活性
TC20 細(xì)胞計(jì)數(shù)器采用多焦點(diǎn)平面分析功能來(lái) 評(píng)估細(xì)胞活性。傳統(tǒng)的活性分析方法采用單焦點(diǎn)平面,這可能導(dǎo)致不[accuracy]的結(jié)論,因?yàn)楣饩€(xiàn)散射和計(jì)數(shù)池中不同高度的細(xì)胞對(duì)齊可能改變細(xì)胞的外觀,即活細(xì)胞看上 去像死細(xì)胞,而死細(xì)胞看上去卻像活細(xì)胞。為確定細(xì)胞是否具有活性,TC20 計(jì)數(shù)器會(huì)在聚焦步驟中使用從多個(gè)焦點(diǎn)平面獲得的圖像分析每個(gè)細(xì)胞。
使用多焦點(diǎn)平面分析確定細(xì)胞活性
TC20™ 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器采用自動(dòng)聚焦顯微鏡,可分析多個(gè)焦點(diǎn)平面來(lái)確定理想中平面。隨后,細(xì)胞計(jì)數(shù)算法將使用從理想中焦點(diǎn)平面獲取的圖像來(lái)識(shí)別細(xì)胞并排除殘骸,從而計(jì)算細(xì)胞總數(shù)。
在評(píng)估細(xì)胞活性時(shí),使用自動(dòng)聚焦代替具有主觀性的人工聚焦特別重要,因?yàn)槿绻x錯(cuò)了焦點(diǎn)平面,將導(dǎo)致不[accuracy]的結(jié)果。
如果在計(jì)算細(xì)胞總數(shù)時(shí)檢測(cè)到臺(tái)盼藍(lán),TC20 計(jì)數(shù)器將評(píng)估細(xì)胞活性。傳統(tǒng)的活性分析方法采用單焦點(diǎn)平面,這可能導(dǎo)致不[accuracy]的結(jié)論,因?yàn)楣饩€(xiàn)散射和計(jì)數(shù)池中不同高度的細(xì)胞對(duì)齊可能改變細(xì)胞的外觀,即活 細(xì)胞看上去像死細(xì)胞,而死細(xì)胞看上去卻像活細(xì)胞。為確定細(xì)胞是否具有活性,TC20 計(jì)數(shù)器會(huì)在聚焦步驟中使用從多個(gè)焦點(diǎn)平面獲得的圖像分析每個(gè)細(xì)胞。
* 在單焦點(diǎn)平面上,35% 的活細(xì)胞被錯(cuò)誤地識(shí)別為死細(xì)胞。多焦點(diǎn)平面分析對(duì) HeLa 細(xì)胞活/死計(jì)數(shù)[accuracy]性的影響。 活性評(píng)估 活細(xì)胞百分比 死細(xì)胞百分比 理想中單焦點(diǎn)平面* 35 65 多個(gè)焦點(diǎn)平面* 65 35
髙至限度縮短樣品制備時(shí)間
TC20 細(xì)胞計(jì)數(shù)器適用于廣泛的濃度范圍,計(jì)數(shù)之前無(wú)需稀釋細(xì)胞,有助于減少采取其他細(xì)胞計(jì)數(shù)方法時(shí)因可能需要稀釋樣品而產(chǎn)生的誤差。計(jì)數(shù)算法可區(qū)分并計(jì)數(shù)聚類(lèi)([much]多含五個(gè)細(xì)胞)中的各個(gè)細(xì)胞,加載之前無(wú)需過(guò)于分離細(xì)胞即可得出[accuracy]的計(jì)數(shù)。
數(shù)據(jù)分析和管理
查看細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果后,用戶(hù)可以選擇在 TC20™ 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器上查看所計(jì)數(shù)的細(xì)胞的圖像,而且只需按一下按鈕即可放大圖像。 計(jì)數(shù)完畢后,可立即將相應(yīng)細(xì)胞圖像的 JPEG 文件導(dǎo)出至 USB 閃存驅(qū)動(dòng)器;若要保存每一張細(xì)胞圖像,可啟用自動(dòng)數(shù)據(jù)導(dǎo)出功能。每一張細(xì)胞圖像都包含一個(gè)元標(biāo)記,其中記錄了計(jì)數(shù)數(shù)據(jù),可使用 TC20 數(shù)據(jù)分析器軟件進(jìn)行進(jìn)一步分析。此軟件(可選)可用于查看單張圖像、執(zhí)行多文件比較分析,以及生成報(bào)告。 TC20 細(xì)胞計(jì)數(shù)器可存儲(chǔ) 100 次計(jì)數(shù)結(jié)果,您隨時(shí)可以根據(jù)購(gòu)買(mǎi)日期和實(shí)驗(yàn)時(shí)間找出計(jì)數(shù)結(jié)果。以前的計(jì)數(shù)結(jié)果可通過(guò) USB 端口導(dǎo)出并在 Microsoft Excel 電子表格中打開(kāi),有助于輕松比較每次試驗(yàn)的結(jié)果。 您可以一個(gè)與計(jì)數(shù)結(jié)果和 JPEG 圖像關(guān)聯(lián)的自定義樣品名稱(chēng)。為節(jié)省處理多個(gè)重復(fù)樣品的時(shí)間,可啟用自動(dòng)命名序列化選項(xiàng)來(lái)填充以數(shù)字標(biāo)識(shí)的名稱(chēng)序列。 可將熱敏標(biāo)簽打印機(jī)(可選)連接至 TC20 計(jì)數(shù)器,直接將結(jié)果打印到可粘貼在實(shí)驗(yàn)室筆記本中的標(biāo)簽上,以便跟蹤計(jì)數(shù)結(jié)果。 用戶(hù)可以訪(fǎng)問(wèn)內(nèi)置稀釋濃度計(jì)算器,以確定可達(dá)到下一次試驗(yàn)要求的細(xì)胞濃度的稀釋體積。
性能
以下數(shù)據(jù)顯示 TC20™ 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器適合分析多種細(xì)胞類(lèi)型,例如細(xì)胞系、原代細(xì)胞(來(lái)自組織或血液)和干細(xì)胞。TC20 細(xì)胞計(jì)數(shù)器可計(jì)數(shù)直徑為 6–50 微米、濃度范圍為 5 x 104–1 x 107 個(gè)細(xì)胞/毫升的細(xì)胞;由于濃度范圍很大,因而不再需要稀釋細(xì)胞,有助于減少計(jì)數(shù)之前因稀釋樣品而產(chǎn)生的誤差。
事實(shí)表明,TC20 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器可[accuracy]計(jì)算多種大小的細(xì)胞數(shù)量。
使用血球計(jì)、TC20 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器和競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手基于圖像的自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器對(duì)?。≒BMC 和 PanT)、中 (HeLa) 和大 (MEF) 細(xì)胞進(jìn)行了計(jì)數(shù)。TC20 計(jì)數(shù)器和血球計(jì)細(xì)胞計(jì)數(shù)在統(tǒng)計(jì)上沒(méi)有表現(xiàn)出顯著差別。精度由標(biāo)準(zhǔn)偏差提示;誤差線(xiàn)表示平均標(biāo)準(zhǔn)偏差。通過(guò) TC20 計(jì)數(shù)器計(jì)算細(xì)胞數(shù)量時(shí),使用了一部?jī)x器和四個(gè)重復(fù)。事實(shí)表明,TC20 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器可[accuracy]計(jì)算活細(xì)胞的數(shù)量。
使用血球計(jì)、TC20 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器和競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手基于圖像的自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器對(duì)與臺(tái)盼藍(lán)混合的 Pan T 細(xì)胞 (1:1) 進(jìn)行了計(jì)數(shù)。TC20 計(jì)數(shù)器和血球計(jì)細(xì)胞計(jì)數(shù)在統(tǒng)計(jì)上沒(méi)有表現(xiàn)出顯著差別。精度由標(biāo)準(zhǔn)偏差提示;誤差線(xiàn)表示平均標(biāo)準(zhǔn)偏差。通過(guò) TC20 計(jì)數(shù)器計(jì)算細(xì)胞數(shù)量時(shí),使用了四部不同的儀器和五個(gè)重復(fù)。