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DNA測(cè)序服務(wù) 檢測(cè)服務(wù)

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公司名稱(chēng)上海閃晶分子生物科技有限公司
品牌其他品牌
型號(hào)
所在地上海市
廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
更新時(shí)間2023/5/23 12:41:21
訪問(wèn)次數(shù)186

產(chǎn)品標(biāo)簽:

DNA測(cè)序服務(wù)測(cè)序

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公司介紹主營(yíng)產(chǎn)品

上海閃晶生物科技有限公司2004年成立于上海，是一家長(zhǎng)期致力生物醫(yī)藥研發(fā)外包服務(wù)的公司，現(xiàn)階段業(yè)務(wù)內(nèi)容主要有引物探針合成、基因合成、多肽合成、蛋白表達(dá)純化服務(wù)、熒光定量PCR服務(wù)、抗體制備服務(wù) 、SNP分析和慢病毒包裝等相關(guān)服務(wù)，同時(shí)提供部分診斷試劑原料和試劑。公司坐落于上海市紫竹科技園附近,毗鄰上海交大、華東師范大學(xué)及國(guó)際跨國(guó)公司；學(xué)術(shù)氛圍濃郁，具有得天獨(dú)厚的人文環(huán)境。閃晶公司始終以“專(zhuān)業(yè)公司，打造專(zhuān)業(yè)服務(wù)'為理念，努力為客戶(hù)提供服務(wù)。

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抗體，技術(shù)服務(wù)，生化試劑，實(shí)驗(yàn)室耗材

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DNA測(cè)序技術(shù)主要依據(jù) Sanger 的雙脫氧鏈終止法。以DNA單鏈為模板，在特定條件下，用特異的引物在測(cè)序級(jí)DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，不斷將 4 種脫氧核糖核苷酸 (dNTP) 加到引物的 3'- 羥基末端并使引物鏈得到延伸。

DNA測(cè)序服務(wù) 檢測(cè)服務(wù) 產(chǎn)品信息

DNA測(cè)序原理

DNA測(cè)序技術(shù)主要依據(jù) Sanger 的雙脫氧鏈終止法。以DNA單鏈為模板，在特定條件下，用特異的引物在測(cè)序級(jí)DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，不斷將 4 種脫氧核糖核苷酸 (dNTP) 加到引物的 3'- 羥基末端并使引物鏈得到延伸。這種鏈的延伸是通過(guò)引物的 3'- 羥基和脫氧核糖核苷酸底物的 5'- 磷酸基團(tuán)形成磷酸二酯鍵來(lái)完成的。如果這種反應(yīng)體系中加入雙脫氧核糖核苷酸 (ddNTP) ，這種 2'3'ddNTP 的 5'- 磷酸基團(tuán)是正常的 (4 種不同的熒光標(biāo)記 ) ，而 3' 位置缺少羥基，因此在 DNA 聚合酶作用下，仍然可以通過(guò) 5'- 磷酸基團(tuán)與引物鏈的 3'- 羥基反應(yīng)摻入到引物鏈中，但是由于 ddNTP 沒(méi)有 3'- 羥基，不能繼續(xù)與下一個(gè) 5'- 磷酸基團(tuán)形成磷酸二酯鍵而導(dǎo)致引物鏈延伸的終止。這樣，在測(cè)序反應(yīng)體系中， DNA 引物鏈不斷合成與偶然終止，產(chǎn)生一系列的長(zhǎng)短不等的核苷酸鏈，然后將這些反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行電泳，即可得測(cè)序圖譜。

樣品要求

樣品類(lèi)型	相應(yīng)要求
菌體	1. 說(shuō)明載體抗性類(lèi)型，我們提供 Amp, Kan, Tet 及 Chl 四種抗生素。 2. 提供 1ml 左右過(guò)夜培養(yǎng)的菌液，加 15% 滅菌甘油，于 Eppendorf 管中封口保存，防止交叉污染或滲漏。 3. 大量樣品測(cè)序，建議在一次性塑料培養(yǎng)皿固體培養(yǎng)基上穿刺培養(yǎng)。 4. 建議盡量提供穿刺培養(yǎng)的菌種。
質(zhì)粒	1. 質(zhì)粒溶于適量體積雙蒸水中（不含 TE ），電泳檢測(cè)總量大于 2mg 。 2. 建議用相關(guān)試劑盒純化。 3. 如有可能，同時(shí)提供 1ml 含有相應(yīng)質(zhì)粒的菌液備用。 4. 大質(zhì)粒必需注明載體長(zhǎng)度。
未純化 PCR 產(chǎn)物	1. 片段大于 150bp 。 2. 提供 50ul ～ 100ul PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物 ( 總量 500ng-1ug) 。 3. 取 3ul 樣品，電泳檢測(cè)應(yīng)為明亮的一條帶，無(wú)雜帶。
純化 PCR 產(chǎn)物	1.PCR 產(chǎn)物溶于雙蒸水中（不含 TE ）。 2. 濃度大于 20ng/ul ，體積大于 20ul ，長(zhǎng)片段需適當(dāng)增加量。 3. 電泳檢測(cè)條帶專(zhuān)一。
自備的引物	1. 濃度不低于 5pmole/ul( 或 5umol/L) ，體積大于 20ul 。 2. 隨機(jī)引物和簡(jiǎn)并引物不能用于測(cè)序。 3. 盡可能提供引物全序列、 PCR 退火溫度，以供參考。