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磷脂酰肌醇三磷酸(PIP3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

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  • 更新時間2023/8/1 20:25:23
  • 訪問次數(shù)244
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上海樂必德通用設(shè)備有公司是專門生產(chǎn)制造通風機,凈化器,環(huán)保設(shè)備,可以提供各類通風機設(shè)備檢測檢修服務。

測試
保存條件:2-8℃冷藏數(shù)量:666保質(zhì)期:6適應物種:多物種用途范圍:科研實驗產(chǎn)地:上海品牌:科翰盛規(guī)格:48T96T樣本:血清
磷脂酰肌醇三磷酸(PIP3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 產(chǎn)品信息
保存條件: 2-8℃冷藏
數(shù)量: 666
保質(zhì)期: 6
適應物種: 多物種
用途范圍: 科研實驗
產(chǎn)地: 上海
品牌: 科翰盛
規(guī)格: 48T 96T
樣本: 血清,血漿,尿液,組織等
檢測方法: 酶聯(lián)免疫
應用: 科研
貨號: KHSJ18144

檢測原

盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA) 。往 包被植物果糖磷脂酰肌醇三磷酸(PIP3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 抗體的包被微孔中,依 次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。 用底物TMB顯色,TMB在化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的 作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的磷脂酰肌醇三磷酸(PIP3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光  (OD ) ,計算樣品活性。

品收集、處理及保存方法

1.  樣本不能含疊氮鈉 (NaN3) ,因為疊氮鈉 (NaN3) 是辣根 化物酶 (HRP) 的劑。

2.  標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行。

3.  植物萃取液或其它相關(guān)樣本:請1000 x g離心20分鐘,取上清 可檢測。

4.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存

 

 

 

-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解。

自備物品

1. 酶標儀 (450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

作注意事項

1.  試劑盒保存在 2-8℃ ,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的 縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶溶解 后再使用。

2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封 (低溫干燥) 保 

3.  濃度 0 的 S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明 書操作時樣本已經(jīng)稀釋 5 倍,最終結(jié)果乘以 5 才是樣本實際濃度。

4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。


 


 

 

 

試劑盒組成

 

96 孔配

48 孔配置

微孔酶標板

12 孔×8

12 孔×4

準品

0.3mL*6 管

0.3mL*6 管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物 A

6mL

3mL

B

6mL

3mL

止液

6mL

3mL

封板膜

2 

2 張

說明書

1 

1 

封袋

1 

1 

注:標準品 (S0-S5) 濃度依次為:0,20,40,80,160,320 U/mL

試劑的準備

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的20×洗滌 緩沖液加 19 份的蒸餾水。

洗板方法

1.  手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 1min 后甩盡 孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板 5 次。

2.  自動洗板機:每孔注入洗液 350 μL,浸泡 1min,洗板 5 次。

1.  從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自 袋密封放回4℃。

2.  設(shè)標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50 μ L;

3.  樣本孔先加待測樣本 10 μL,再加 40 μL;空白孔不 加。

4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根化物酶  (HRP) 標記的檢測抗體 100 μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋 或恒溫箱溫育 60min。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去 洗滌液,吸水紙上干,如此重復洗板 5 次 (也可用洗板機洗板) 。

6.  每孔加入底物 A、B 各 50 μL,37℃避光孵育 15min。

7.  每孔加入終止液 50 μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

結(jié)果判斷

繪制準曲線:在 Excel 工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應 OD 作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣 濃度值。


責聲明

1.   試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或?qū)嶒?否則所 產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。

2.   嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者 擔。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

試劑盒性能

1.  準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù) R 值,大于等于

0.9900。

2.  靈敏度:檢測濃度小于 0.1 U/mL。

3.  特:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。

4.  重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于 15%。

5.  貯藏:2-8℃ ,避光防潮保存。

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