原代細胞是來源于胚胎、組織器官及外周血樣本經(jīng)特殊實驗方法處理而制備的原初培養(yǎng)細胞,這一過程被稱為原代細胞分離。原代細胞具有保持原有細胞的基本性質,如果是正常細胞,仍然保留二倍體數(shù)。
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細胞的分離純化和細胞培養(yǎng)技術是細胞生物學實驗的基礎,通常把代至第十代以內的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞。原代細胞培養(yǎng)是指將組織從動物體內取出,經(jīng)各種酶(常用)、螯合劑(常用EDTA) 或機械方法剪碎處理,分散成單細胞,在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞得以生存、生長和繁殖的過程。
原代細胞分離和培養(yǎng)項目 | ||
大鼠骨髓間充質干細胞原代培養(yǎng) | 小鼠海馬神經(jīng)元細胞原代分離培養(yǎng) | 細胞傳代培養(yǎng) |
大鼠膝關節(jié)軟骨細胞的原代培養(yǎng) | 心肌成纖維細胞(CFs)原代培養(yǎng) | 內皮細胞培養(yǎng) |
大鼠脂肪間充質干細胞原代培養(yǎng) | 骨髓內皮組細胞原代培養(yǎng) | 胃上皮細胞培養(yǎng) |
脂肪/骨髓/牙源間充質干細胞 | 小鼠海馬/大鼠脊髓神經(jīng)元細胞 | 神經(jīng)元細胞培養(yǎng) |
人眼眶/大鼠心肌成纖維細胞 | 乳鼠心肌細胞培養(yǎng)操作 | 滑膜細胞原代培養(yǎng) |
牛視網(wǎng)膜/小鼠腦微血管內皮細胞 | 大白兔/大鼠膝關節(jié)軟骨細胞 | 小鼠巨噬、小膠質/大鼠肝細胞 |
原代細胞分離與培養(yǎng)方法
懸浮細胞的分離方法:組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
實體組織材料的分離方法:對于實體組織材料,由于細胞間結合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
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