人血清白蛋白（HSA）是人血漿中酸性藥物的重要載體之一，并且可逆地結合大量不同的化合物。已為HSA確定了幾個不同的配體結合位點。其中，Site I被確定為主要的藥物結合位點之一。人血清白蛋白（HSA）I位結合檢測試劑盒是一種基于熒光的高通量測定法，用于確定小分子與HSA的結合。該測定法基于新型熒光探針HSA Blue™S1。它的特征是具有特別的光譜和結合特性，可與HSA的位點1結合。HSA Blue™S1在蛋白質結合狀態(tài)和蛋白質未結合狀態(tài)之間顯示出較大的熒光強度差異。在HSA Blue™S1存在下，小分子競爭HSA結合會導致熒光強度低。該測定法可用作高通量篩選工具，以確定在站點I處與HSA的總結合。百螢生物為您提供優(yōu)質的人血清白蛋白（HSA）I位結合檢測試劑盒。
適用儀器
| 熒光酶標儀 | |
| Ex: | 365 nm |
| Em： | 480 nm |
| Cutoff： | 435 nm |
| 推薦孔板: | 純黑色孔板 |
| 讀取模式: | 頂部讀取 |
樣品分析方案
概述
在微孔板孔中制備樣品
從樣品中取出液體
添加鬼筆環(huán)肽-iFluor 488標記溶液（100μL/孔）
在室溫下染色細胞20至90分鐘
清洗細胞在顯微鏡下觀察樣品
注意：將小瓶加熱至室溫并在打開前短暫離心。
儲備溶液配制
將100 µL DMSO（組分D）加入HSA Blue™S1（組分A）中并充分混合。
注意：將未使用的HSA Blue™S1儲備溶液分裝成一小份保存在-20°C下，以避免凍融循環(huán)。
工作溶液配制
將50 µL HSA Blue™S1儲備溶液加入5 mL HSA分析緩沖液（組分B）中，并充分混合。
注意：HSA Blue™S1工作溶液不應儲存，應立即使用。
注意：5 mL HSA Blue™S1工作溶液足以用于一個96孔板。
將250 µL HSA溶液（組分C）加入5 mL HSA分析緩沖液（組分B）中并充分混合。
注意：5 mL HSA工作溶液足以用于一個96孔板。
使用HSA分析緩沖液（組分B）將藥物原液在3X工作溶液中稀釋至所需濃度。
注意：對于此處提到的方案，每孔的建議體積為50 µL。
操作步驟
以下方案可用作參考，實際應根據(jù)需要進行調整。
在孔中加入50 µL HSA Blue™S1工作溶液。
在孔中加入50 µL HSA工作溶液。
在各自的孔中加入50 µL藥物工作溶液。（總體積= 150 µL /孔）。
將樣品在室溫下孵育30分鐘。
使用熒光酶標儀在Ex / Em = 365/480 nm（截止= 435 nm）處檢測熒光的增加。
