信帆提供:HE染色實驗檢測服務(wù)
HE染色法,即是蘇木精伊紅染色法。石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)分別稱為嗜堿性和嗜酸性;若于兩種染料的親和力都不強,則呈中性。一般的組織變化和組織產(chǎn)物都可以通過這一染色法顯示出來。是形態(tài)學(xué)最-常用的染色方法。
染色結(jié)果:
細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。
樣本包埋與固定
(1)固定:根據(jù)需要取材后置于福爾馬林中固定48小時后;
(2)洗滌與脫水,將固定后的組織用流水沖洗,去除殘留的固定液和雜質(zhì)。不同濃度的乙醇逐級脫水,50%、 70%、 85%、 95%直至純酒精(無水乙醇),每級2小時。70%乙醇中可長期保存;
(3)透明: 50%酒精+50%二甲苯中2小時,純二甲苯兩小時,再- -次純二甲苯兩小時;
(4)浸蠟:先把組織材料塊放在熔化的石蠟和二甲苯的等量混合液浸漬1~2小時,再先后移入2個熔化的石蠟液中浸漬各3小時左右;
(5)包埋:將浸好蠟的組織塊放入裝有蠟液的容器中,擺好組織塊位置。待石蠟?zāi)毯髮⒅車嘤嗟氖炄コ?,?zhǔn)備切片;
(6)切片:將切片刀裝在刀片機的刀架上并固定緊,固定蠟塊底座或蠟塊,調(diào)整蠟塊與刀至合適位置,刀刃與蠟塊表面呈5度角。調(diào)整切片機上的切片厚度為4-7μm,然后切片。
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