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細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)試劑盒微板法

參考價1090.00
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  • 公司名稱上海宇淳生物科技有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 更新時間2024/5/22 13:49:27
  • 訪問次數(shù)335
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上海宇淳生物科技有限公司是一家致力于生物技術(shù)服務(wù)、實驗試劑和耗材銷售,有專業(yè)的科研實驗技術(shù)服務(wù)人員。承接免疫學、分子學、細胞學、病理學、動物造模等技術(shù)實驗,可為高校醫(yī)院及科研單位提供包括病理學、免疫學、細胞生物學、生物化學、動物實驗等技術(shù)服務(wù),并建立了包含實驗設(shè)計項目實施結(jié)果整理數(shù)據(jù)分析及策略咨詢等一站式的科研服務(wù)。本公司還代理許多先進水平的產(chǎn)品,包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、診 斷等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。 公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國,在同行獲得*好評。 特別是生物試劑和細胞產(chǎn)品更是種類齊全、價格實惠。主營產(chǎn)品/服務(wù):試劑盒:ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學試劑盒、細胞凋亡試劑盒。 細胞:美國*原代細胞,細胞系 ,細胞株,專業(yè)培養(yǎng)基,常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基, 耗材:細胞培養(yǎng)耗材、普通實驗耗材。 生化試劑:*生化試劑、進口分裝生化試劑、國產(chǎn)生化試劑。 抗體:進口原裝抗體、進口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗等等 。公司的理念是:為您提供*的產(chǎn)品及服務(wù),產(chǎn)品價格較好的競爭力。




sigma試劑,核酸染料試劑,熒光定量PCR試劑,活體成像試劑,熒光探針試劑,細胞增殖與毒性檢測試劑盒,超敏ECL發(fā)光液,細胞染色試劑,吸頭
級別 其他
細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)試劑盒微板法
蔗糖酶即蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,E.C.3.2.1.26)在蔗糖代謝中催化蔗糖分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。
細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)試劑盒微板法 產(chǎn)品信息

細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)試劑盒微板法

細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)試劑盒微板法

本試劑盒僅供科研使用 1 細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)試劑盒說明書 (貨號:WS8150W 微板法 48 樣) 一、產(chǎn)品簡介: 蔗糖酶即蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,E.C.3.2.1.26)在蔗糖代謝中催化蔗糖分解為果糖和葡萄糖,是高等 植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 PH 值,蔗糖轉(zhuǎn)化酶分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩 種類型,許多報道均將中性轉(zhuǎn)化酶同堿性轉(zhuǎn)化酶看作一種轉(zhuǎn)化酶。 AI 的最適 pH 3.05.0AI 分為可溶性 AI(S-AI)和細胞壁不溶性 AIB-AIcell-wall binding acid invertase)兩種類型,前者分布在液泡中或細胞自由空間,后者存在于細胞間隙并結(jié)合在細胞壁上。B-AI 主要參與韌皮部質(zhì)外體卸載時蔗糖的分解,以維持庫源之間蔗糖的濃度。 B-AI 催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進一步與 3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,經(jīng)光譜 掃描在 540nm 有特征光吸收,在一定范圍內(nèi) 540nm 光吸收增加速率與 B-AI 活性成正比。 二、試劑盒的組成和配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 提取液 A 液體 60mL×1 4℃保存 提取液 B 液體 60mL×1 4℃保存 試劑一 液體 30mL×1 4℃保存 試劑二 粉劑×1 4℃保存 用前加入 7.5mL 試劑一充分溶解 備用;用不完的試劑 4保存; 試劑三 液體 10mL×1 4℃保存 標準品 粉體 mg×1 4℃保存 若重新做標曲,則用到該試劑 三、所需的儀器和用品: 酶標儀、96 孔板、低溫離心機、水浴鍋、移液器、研缽、冰和蒸餾水。 四、細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)活性測定: 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗 樣本和試劑浪費! 1、樣本制備: ① 按照組織質(zhì)量(g):提取液 A 體積(mL)15~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織, 加入 1mL 提取液 A),進行冰浴勻漿。12000rpm 4℃離心 10min,棄上清,留沉淀。 ② 沉淀中加入 1mL 蒸餾水,震蕩混勻,12000rpm4℃離心 10min,棄上清,留沉淀。 ③ 沉淀中加入 1mL 提取液 B 充分混勻,4℃浸提過夜,12000 rpm 4℃離心 20min,取 上清置冰上待測。 2、上機檢測1 酶標儀預熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 540nm。 ② 在 EP 管中依次加入: 試劑名稱(μL測定管 對照管 樣本 40 40 試劑一 100 200 試劑二 100 混勻, 37℃準確水浴 20min 后,95℃水浴 10min(用封口膜纏緊, 以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻(以保證濃度不變) 試劑三 100 100 混勻,95℃水浴 10min(用封口膜纏緊,以防止水分散失),流水冷本試劑盒僅供科研使用 2 卻后充分混勻,吸取 200μL 轉(zhuǎn)移至 96 孔板中,540nm 處讀取吸光值 A,ΔA=A 測定-A 對照(每個測定管需設(shè)一個對照管)。 【注】:1.若吸光值大于 1.5,可以用蒸餾水稀釋樣本后測定,計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù) D。 2.ΔA 值在零附近徘徊,可增加樣本加樣體積 V1(如增至 80μL,則試劑一相應(yīng)減少),或延 37℃水浴時間(如增至 40min 或更長),則相應(yīng)的 V1 T 需代入公式重新計算。 五、結(jié)果計算: 1、標準曲線方程為 y = 0.007x - 0.0234;x 為標準品質(zhì)量(μg),y ΔA。 2、按蛋白濃度計算: 單位定義:37℃每毫克蛋白每分鐘產(chǎn)生 1μg 還原糖定義為一個酶活性單位。 細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)(μg/min/mg prot)=[(ΔA+0.0234)÷0.007]÷(V1×Cpr)÷T×D =178.6×(ΔA+0.0234)÷Cpr×D 3、按鮮重計算: 單位定義:37℃每克組織每分鐘產(chǎn)生 1μg 還原糖定義為一個酶活性單位。 細胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)(μg/min/g 鮮重)=[(ΔA+0.0234)÷0.007]÷(W×V1÷V)÷T×D =178.6×(ΔA+0.0234)÷W×D V---加入提取液體積,1mL; V1---加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.04mL; T---反應(yīng)時間,20min; W---樣本鮮重,gD---稀釋倍數(shù),未稀釋即為 1; Cpr---樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;建議使用本公司的 BCA 蛋白含量檢測試劑盒; 附:標準曲線制作過程: 1 制備標準品母液(5mg/mL):向標準品 EP 管里面加入 1mL 蒸餾水(母液需在兩天 內(nèi)用且-20℃保存)。 2 把母液稀釋成六個濃度梯度的標準品:0, 1, 2, 3, 4, 5. mg/mL。也可根據(jù)實際樣本來 調(diào)整標準品濃度。 3 按照:40μL 標準品+200μL 試劑一+100μL 試劑三,依次加樣操作,95℃水浴 10min, 冷卻后,取 200μL 96 孔板中,540nm 下測定,根據(jù)結(jié)果即可制作標準曲線。

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