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Cell Counting Kit-8細胞增殖檢測試劑盒

參考價516.00
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 公司名稱上海信裕生物科技有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號C6005M
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
  • 更新時間2024/12/31 15:48:55
  • 訪問次數(shù)2490
產(chǎn)品標簽:

細胞增殖檢測試劑盒

規(guī)格
500T516.00元30 盒可售
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上海信裕生物科技有限公司是一家生物高新技術(shù)企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。并代理銷售Amresco,qiagen,GenWay,Sciencell,Millipore,eBioscience,Sigma、R&D、GBD、ATCC、HYCLONE等二十多家國內(nèi)外,致力于為廣大高校、科研院所和企業(yè)單位提供的科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù),滿足生物化學、分子生物學 、細胞生物學、免疫學 ELISA試劑盒等生物科技實驗需求。

上海信裕先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學,暨南大學,南京工業(yè)大學,曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。

公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!



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Cell Counting Kit-8(CCK-8)細胞增殖試劑盒

產(chǎn)品貨號:C6005M

產(chǎn)品規(guī)格:500T

儲存條件:4℃避光保存,長期儲存置于-20℃,有效期見外包裝。
Cell Counting Kit-8細胞增殖檢測試劑盒 產(chǎn)品信息

Cell Counting Kit-8(CCK-8)細胞增殖試劑盒

產(chǎn)品貨號:C6005M

產(chǎn)品規(guī)格:500T

儲存條件:4℃避光保存,長期儲存置于-20℃有效期見外包裝。

產(chǎn)品介紹:

Cell Counting Kit-8簡稱CCK8(或WST-8)試劑盒,是一種基于WST-8(化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4- 二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)顯色反應(yīng)的廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。 

WST-8 工作原理:在電子耦合試劑存在的條件下,可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物 (formazan)。顏色的深淺與細胞的增殖成正比,與細胞毒性成反比。使用酶標儀在 450 nm 波長處測定 OD 值,間接反映 活細胞數(shù)量。 

WST-8 是 MTT 的一種升級替代產(chǎn)品,和 MTT 或其它 MTT 類似產(chǎn)品如 XTTMTS 等相比有明顯的優(yōu)點。首先,MTT 被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的甲臜不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而 WST-8、XTT 和 MTS 產(chǎn)生的甲臜 都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-8 產(chǎn)生的甲臜比 XTT 和 MTS 產(chǎn)生的甲臜更易溶解。再次,WST-8 比 XTT 和 MTS 更加穩(wěn)定,使實驗結(jié)果更加穩(wěn)定。另外,WST-8 與 MTT、XTT 相比線性范圍更寬,靈敏度更高。 

CCK 法廣泛應(yīng)用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等方面。

使用方法:

1. 細胞活性檢測

1)在 96 孔板中接種細胞懸液(100 μL/孔),建議可以設(shè)置 個細胞濃度梯度,每個濃度設(shè)置 個重復進行細胞鋪板, 例如按照細胞個數(shù) 0/312.5/625/1250/2500/5000/10000/20000 cells/96 孔板進行鋪板。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜(37℃, 5% CO2)。

2)向每孔加入 10 μL CCK 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數(shù))。 注:如產(chǎn)品有析出,可 37℃水浴處理,不影響使用。 

3)將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 0.5 - 4 h。 注:初次實驗可以在 0.5、1、和 4 h 后分別用酶標儀檢測,然后選取吸光度范圍比較適宜的一個時間點用于后續(xù)實驗。 

4)用酶標儀測定在 450 nm 和 600 nm(消除孔板本底干擾)處的吸光度。 (5)若暫時不測定 OD 值,可以向每孔中加入 10 μL 0.1 M 的 HCl 溶液或者 1% w/v SDS 溶液,并將培養(yǎng)板在室溫條件下避 光保存。24 h 內(nèi)測定,吸光度不會發(fā)生變化。

2. 細胞增殖-毒性檢測

1)在 96 孔板中接種 100 μL 的細胞懸液,建議可以設(shè)置 個細胞濃度梯度,每個濃度設(shè)置 個重復進行細胞鋪板,例如 按照細胞個數(shù) 0/312.5/625/1250/2500/5000/10000/20000 cells/96 孔板進行鋪板。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜(37℃, 5% CO2

2)向培養(yǎng)板加入 1 - 10 μL 特定的藥物刺激。 

3)于培養(yǎng)箱中孵育一段時間(例如:6、12、24 或 48 h)。

4)向每孔加入 10 μL CCK 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數(shù))。 注:如產(chǎn)品有析出,可 37℃水浴處理,不影響使用。

5)將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 0.5 – 4 h。 注:初次實驗可以在 0.51、和 4 h 后分別用酶標儀檢測,然后選取吸光度范圍比較適宜的一個時間點用于后續(xù)實驗。

6)用酶標儀測定在 450 nm 和 600 nm(消除孔板本底干擾)處的吸光度。

7)若暫時不測定 OD 值,可以向每孔中加入 10 μL 0.1 M 的 HCl 溶液或者 1% w/v SDS 溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室 溫條件下。24 h 內(nèi)測定,吸光度不會發(fā)生變化。

注:如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,可在加 CCK 之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然 后加入新的培養(yǎng)基),去掉藥物影響。當然藥物影響比較小的情況下,可以不更換培養(yǎng)基,直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的 空白吸收即可。

3. 計算公式

細胞存活率=[(As-Ab)/(Ac-Ab)]x 抑制率 =[(Ac-As)/(Ac-Ab)]x As:實驗孔(含有細胞的培養(yǎng)基、CCK-8、待測藥物)的吸光度 Ac:對照孔(含有細胞的培養(yǎng)基、CCK-8、沒有待測藥物)的吸光度 Ab:空白孔(不含細胞和待測藥物的培養(yǎng)基、CCK-8)的吸光度

注意事項

1. 使用前請將產(chǎn)品瞬時離心至管底,再進行后續(xù)實驗。

2. 使用96孔進行細胞鋪板,如果培養(yǎng)時間較長, 一定要注意蒸發(fā)問題。建議采取棄用周圍一圈的辦法,改加相同量的PBS、 水或者培養(yǎng)液。 

3. 用酶標儀檢測前需確保每個孔內(nèi)沒有氣泡,否則會干擾測定。 

4. 本產(chǎn)品僅限于科研,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 

5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


關(guān)鍵詞:酶標儀 培養(yǎng)箱
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