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Ca2+—ATP酶試劑盒

參考價	￥240.00

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￥240.00

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公司名稱上海宇淳生物科技有限公司
品牌其他品牌
型號
所在地上海市
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
更新時間2024/6/20 15:56:17
訪問次數(shù)471

產(chǎn)品標(biāo)簽:

Ca2+—ATP酶試劑盒

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上海宇淳生物科技有限公司是一家致力于生物技術(shù)服務(wù)、實驗試劑和耗材銷售，有專業(yè)的科研實驗技術(shù)服務(wù)人員。承接免疫學(xué)、分子學(xué)、細(xì)胞學(xué)、病理學(xué)、動物造模等技術(shù)實驗，可為高校醫(yī)院及科研單位提供包括病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、動物實驗等技術(shù)服務(wù)，并建立了包含實驗設(shè)計項目實施結(jié)果整理數(shù)據(jù)分析及策略咨詢等一站式的科研服務(wù)。本公司還代理許多先進(jìn)水平的產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國，在同行獲得*好評。特別是生物試劑和細(xì)胞產(chǎn)品更是種類齊全、價格實惠。主營產(chǎn)品/服務(wù):試劑盒：ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒。細(xì)胞：美國*原代細(xì)胞，細(xì)胞系，細(xì)胞株，專業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基，耗材：細(xì)胞培養(yǎng)耗材、普通實驗耗材。生化試劑：*生化試劑、進(jìn)口分裝生化試劑、國產(chǎn)生化試劑。抗體：進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗等等。公司的理念是：為您提供*的產(chǎn)品及服務(wù)，產(chǎn)品價格較好的競爭力。

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sigma試劑，核酸染料試劑，熒光定量PCR試劑，活體成像試劑，熒光探針試劑，細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒，超敏ECL發(fā)光液，細(xì)胞染色試劑，吸頭

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Ca2+—ATP酶試劑盒
Ca2+是細(xì)胞內(nèi)重要的信號分子，細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)始終維持在一個較低水平的 Ca2+濃度，Ca2+ 濃度的維持主要由 Ca2+-ATP 酶來維持

Ca2+—ATP酶試劑盒產(chǎn)品信息

Ca2+—ATP酶試劑盒

Ca2+—ATP酶試劑盒本

試劑盒僅供科研使用 1

Ca2+ - ATP 酶活性測定說明書（貨號：WS0680F 分光法 24 樣）一、產(chǎn)品簡介： Ca2+是細(xì)胞內(nèi)重要的信號分子，細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)始終維持在一個較低水平的 Ca2+濃度，Ca2+ 濃度的維持主要由 Ca2+-ATP 酶來維持，該酶可催化 ATP 水解生成 ADP 和無機(jī)磷。通過測定無機(jī)磷的量來確定該酶活性高低。二、所需的儀器和用品：可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。三、試劑盒的組成和配制：【注】：全程操作需無磷環(huán)境；試劑配置用新的槍頭和玻璃移液器等，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。四、Ca2+-ATP 酶活性檢測：建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗樣本和試劑浪費！ 1、樣本制備： ① 組織樣本：稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液，進(jìn)行冰浴勻漿。 4℃×12000rpm 離心 10min，取上清，置冰上待測。【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量(g)：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取。 ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(104)：提取液(mL)為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 2、上機(jī)檢測： ① 可見分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 700nm，蒸餾水調(diào)零。 ② 所有試劑解凍至室溫（25℃）。 ③ 在 EP 管中依次加入：試劑名稱（μL）測定管對照管試劑一 200 提取液 200 試劑名稱規(guī)格保存要求備注提取液提取液 60mL×1 瓶 4℃保存試劑一粉體 mg×1 瓶 4℃保存用前甩幾下使試劑落入底部，再加 8mL 提取液，混勻溶解備用。試劑二粉體×1 瓶 -20℃保存用前甩幾下使試劑落入底部，再加 15mL 提取液，混勻溶解備用。試劑三液體 4mL×1 瓶 4℃保存試劑四 A:粉體 mg×1 瓶 B:液體 3mL×1 瓶 4℃保存臨用前試劑 A 中加 2.9mL 的 B 液，再加 37.1mL 的蒸餾水，混勻溶解備用。標(biāo)準(zhǔn)品粉體 mg×1 支 4℃保存若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑本試劑盒僅供科研使用 2 樣本 200 試劑二 200 200 37℃ 孵育 20min 試劑三 80 80 樣本 200 混勻，12000rpm，4℃離心 5min，上清液待測 ④ 顯色反應(yīng)：上清液 150 150 試劑四 600 600 混勻，室溫靜置 3min，700nm 下讀取各管吸光值， △A=A 測定-A 對照（每個樣本做一個自身對照）。五、結(jié)果計算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y =0.8474x - 0.0164，x 是標(biāo)準(zhǔn)品摩爾質(zhì)量（μmol/mL）, y 是△A。 2、按蛋白濃度計算：定義：每小時每毫克組織蛋白分解 ATP 產(chǎn)生 1μmol 無機(jī)磷的量為一個酶活力單位。酶活力(μmol/h/mg prot)=[(△A+0.0164)÷0.8474×V2]÷(V1×Cpr)÷T =12.04×(△A+0.0164)÷Cpr 3、按樣本鮮重計算：定義：每小時每克組織分解 ATP 產(chǎn)生 1μmol 無機(jī)磷的量為一個酶活力單位。酶活力(μmol/h/g 鮮重)=[(△A+0.0164)÷0.8474×V2]÷(W× V1÷V)÷T =12.04×(△A+0.0164)÷W 4、按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：定義：每小時每 1 萬個細(xì)菌或細(xì)胞分解 ATP 產(chǎn)生 1μmol 無機(jī)磷的量為一個酶活力單位。酶活力(μmol/h /104 cell)=[(△A+0.0164)÷0.8474×V2]÷(500×V1÷V)÷T =0.024×(△A+0.0164) 5、液體中 Ca2+-ATPase 活力計算: 定義：每小時每毫升液體分解 ATP 產(chǎn)生 1μmol 無機(jī)磷的量為一個酶活力單位。酶活力(μmol/h/mL)=[(△A+0.0164)÷0.8474×V2]÷V1÷T=12.04×(△A+0.0164) V---加入提取液體積，1mL； V1---加入樣本體積，0.2mL ； V2---酶促反應(yīng)總體積，0.68mL； T---反應(yīng)時間，1/3 小時； W---樣本鮮重，g； 500---細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，萬； Cpr---樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；建議使用本公司的 BCA 蛋白含量檢測試劑盒。附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程： 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液（5μmol/mL）：標(biāo)準(zhǔn)品用 10mL 試劑一溶解。（母液需在兩天內(nèi)用）。 2 把母液稀釋成六個濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1. μmol/mL。也可根據(jù)實際樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 依據(jù)顯色反應(yīng)階段測定管的加樣體系操作，根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。