Calcein Deep Red AM 鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯
產(chǎn)品關(guān)鍵詞：
Calcein, AM 鈣黃綠素AM；Calcein Deep Red 鈣黃綠素深紅色；Cy5； 活細(xì)胞染色；Fluorescein diacetate (FDA)；Propidium Iodide（PI）碘化丙啶；
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Calcein Deep Red AM 鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯 | MX3016-1MG | 1mg | 3380 |
【溫馨提示】：見我司（懋康生物）整理的鈣黃綠素（Calcein）系列產(chǎn)品專題，尋找最合適波長的鈣黃綠素活細(xì)胞探針。
產(chǎn)品描述
Calcein, AM，中文名鈣黃綠素乙酰甲酯，CAS NO：148504-34-1，一種具細(xì)胞膜滲透性zui受huan迎的活細(xì)胞熒光染料，用來標(biāo)記和監(jiān)測活細(xì)胞功能，呈綠色熒光（Ex/Em= 490nm/515nm）。然而，Calcein, AM單一顏色使其不能將其用在多重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)，比如，其無法和GFP轉(zhuǎn)染細(xì)胞聯(lián)合使用，因光譜一致。為了解決這一應(yīng)用缺陷，我司特別開發(fā)出Calcein Red（貨號：MX3013），Calcein Deep Red（貨號：MX3016）這些衍生物，能夠聯(lián)合GFP或FITC等熒光素實(shí)現(xiàn)對活細(xì)胞的多重標(biāo)記和功能分析。
我司（懋康生物）提供的鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯（Calcein Deep Red AM）自身無熒光，具有細(xì)胞膜滲透性。能夠輕易進(jìn)入活細(xì)胞，被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解生成鈣黃綠素深紅（Calcein Deep Red），產(chǎn)生強(qiáng)烈的深紅色熒光（Ex/Em=643/663nm），用標(biāo)準(zhǔn)的Cy5濾片設(shè)置檢測。
產(chǎn)品特性
1） 同義名：Calcein Deep Red AM；Calcein Deep Red AM Ester;鈣黃綠素乙酰氧基甲酯（深紅色），鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯；
2） 分子量：~600
3） 純度：≥95%（HPLC）
4） Ex/Em：643/663nm
5） 溶解性：溶于DMSO（1~5mM）
應(yīng)用實(shí)例
Fig 1.HeLa細(xì)胞（活細(xì)胞+固定細(xì)胞）經(jīng)Calcein Deep Red AM（# MX3016）染色的圖片。
保存與運(yùn)輸方法
保存：-20℃干燥保存，避免強(qiáng)光直射，有效期一年。
運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。
注意事項(xiàng)
熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
本品從冰箱取出后請?jiān)诟稍锏沫h(huán)境放至室溫后再開封。由于試劑微量，開封前請將其短暫離心，以保證粉末落入管底。
本品對濕度非常敏感，粉末保存一定要保持干燥。儲存液需要分裝避光凍存，且必須緊緊密封蓋子，干燥保存。工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法
1、儲存液制備
儲存液配制范圍可為2～5 mM，具體根據(jù)工作濃度來決定，建議提前配制成1000×儲存液。若使用的工作液為5μM，那么可配制5mM的儲存液，即往1mgCalcein Deep RedAM（Mw ~600）內(nèi)加入333μl細(xì)胞培養(yǎng)級別的DMSO（貨號：MS4601A-100ML）即可。儲存液需要根據(jù)單次用量分裝，-20℃避光干燥保存，一定要避免受潮，此種情況下可穩(wěn)定保存數(shù)月。
2、染色工作液制備
于正式實(shí)驗(yàn)前，或溶解Calcein Deep RedAM粉末配制儲存液，或取一管已配制好的Calcein Deep RedAM儲存液并回至室溫使充分融化。用添加有2.5mM丙huang舒的HHBS（Hanks with 20mM Hepes buffer）或其他適當(dāng)?shù)木彌_液（pH 7.0）稀釋儲存液到5~10 µM工作濃度。
【注1：Calcein Deep Red染色工作液很不穩(wěn)定，需要使用前配制?！?/span>
【注2：許多細(xì)胞都含有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體。因此高度推薦染色工作液內(nèi)添加2.5mM丙huang舒（有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體抑制劑），以防止熒光探針泄露到細(xì)胞外?！?/span>
3、染色步驟
以下是基于96孔板的Calcein Deep Red活細(xì)胞染色步驟，僅作參考。具體實(shí)驗(yàn)請根據(jù)自身要求做調(diào)整。
細(xì)胞準(zhǔn)備：于黑框/透明底的96孔微孔板內(nèi)按照100~10,000個(gè)細(xì)胞/孔的量鋪板。設(shè)置空白孔（不含細(xì)胞的培養(yǎng)基）?！咀⒁狻浚好糠N細(xì)胞系需要根據(jù)實(shí)際情況來確認(rèn)細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性誘導(dǎo)的細(xì)胞密度。增殖分析，細(xì)胞密度相對少些；毒性分析，起始細(xì)胞密度高些。建議96孔板的單孔體積為100 µL。
藥物處理：加待測藥物到細(xì)胞內(nèi)處理適當(dāng)時(shí)間（比如24h，48h或96h）。設(shè)置空白孔（不含細(xì)胞的培養(yǎng)基），加入相應(yīng)量的待測藥物?！咀⒁狻浚核幬锾砑忧翱刹挥们逑醇?xì)胞。然而，若是藥物是血清敏感性，那在添加藥物前需要吸掉生長培養(yǎng)基和血清因子。替換之細(xì)胞用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)。
吸掉培養(yǎng)基。【注意：探針加載前必須去除培養(yǎng)基】
按照100 µL/孔（96孔板）的量加入Calcein Deep Red染色工作液。
室溫或37℃避光孵育1h?！咀⒁?：適當(dāng)?shù)姆跤龝r(shí)間取決于細(xì)胞類型和使用的細(xì)胞濃度。每個(gè)實(shí)驗(yàn)建議進(jìn)行孵育時(shí)間優(yōu)化?！俊咀⒁?：對于懸浮細(xì)胞，探針孵育結(jié)束后，于800rpm離心2min?！?/span>
用含合適濾光片（Ex/Em= 643nm/663nm）的儀器進(jìn)行熒光檢測。【注意：如果熒光背景高，可在熒光信號檢測前用含2.5mM丙huang舒的HHBS緩沖液替換Calcein Deep Red染色工作液?！?/span>
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MX4205-10MG | Propidium Iodide碘化丙啶 | 10mg |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯 熒光探針鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯 熒光探針
