waters SEC肽分析柱
體積排阻色譜
體積排阻(又稱凝膠過濾)色譜基于蛋白質(zhì)在溶液中的體積(流體動力學半徑)而不是分子量對其進行分離,體積較大的物質(zhì)會在體積較小的肽之前洗脫。這種等度洗脫技術(shù)的主要驅(qū)動機制基于填充柱中SEC顆粒的孔徑和體積。隨著目標肽的分子量增大,應選擇顆??讖较鄬^大的SEC色譜柱。
waters SEC肽分析柱與其它生物分離一樣,在要求極為嚴苛的應用中,相較于基于HPLC的色譜柱,使用粒徑更小的UPLC/UHPLC色譜柱可以在更短的時間內(nèi)實現(xiàn)優(yōu)異的組分分離度。
BioSuite體積排阻色譜柱
BioSuite SEC填料的分子量排阻限值主要取決于色譜柱產(chǎn)品中硅膠基質(zhì)材料的孔徑。此外,SEC填料介質(zhì)的粒徑以及色譜柱柱長也是決定分離效率的重要參數(shù)。在分離效率方面,BioSuite UHR色譜柱(校準表中未顯示)優(yōu),其次是BioSuite HR和標準SEC色譜柱。
Protein-Pak體積排阻色譜(SEC)柱
Protein-Pak填料以10 μm二醇基鍵合硅膠為基礎(chǔ),提供多種孔徑和色譜柱配置。Protein-Pak SEC色譜柱具有以下特性:
分離不同分子量蛋白質(zhì)的速度可提升兩倍
可區(qū)分出分子量差異低至15%的蛋白質(zhì)
分析過程中,樣品質(zhì)量和體積對分離度的影響要比樣品與固定相之間的相互作用更大。理想情況下,固定相與樣品分子之間不會發(fā)生相互作用。通過添加濃度為0.1~0.3 M的鹽可以減少潛在的相互作用。