1.同工酶分析
同工酶分析可以鑒別細(xì)胞的種屬來(lái)源。對(duì)待測(cè)細(xì)胞系的乳酸脫氫酶、6-磷酸葡萄糖脫氫酶、核苷磷酸酶和蘋果酸脫氫酶的同工酶進(jìn)行PAGE膠檢測(cè),通過(guò)與指示細(xì)胞比對(duì),確定細(xì)胞系的種屬來(lái)源和有無(wú)交叉污染。
2.染色體檢查及核型分析
染色體核型分析可用于鑒別細(xì)胞的種屬來(lái)源。用于生物藥生產(chǎn)的新建株及其細(xì)胞庫(kù)必須進(jìn)行染色體檢查。進(jìn)行了遺傳修飾的按照新建株進(jìn)行檢查。
3.PCR法
PCR法可以鑒別細(xì)胞的種屬來(lái)源。保守基因細(xì)胞色素b(CYTB)和氧化酶1(CO1)在不同種屬間具有較大差異,被用來(lái)進(jìn)行種屬的判斷。
4.重組細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性測(cè)試
使用限制性內(nèi)切酶圖譜進(jìn)行插入位點(diǎn)檢測(cè);對(duì)mRNA/cDNA進(jìn)行測(cè)序以檢測(cè)插入片段序列;使用qPCR法檢測(cè)基因拷貝數(shù)。
5.短串聯(lián)重復(fù)序列分析STR法
STR法可用于鑒別種屬內(nèi)的細(xì)胞。不同個(gè)體來(lái)源的細(xì)胞STR位點(diǎn)具有多態(tài)性,據(jù)此可以區(qū)分來(lái)自于同一種屬不同個(gè)體的細(xì)胞。
6.流式檢測(cè)法
流式檢測(cè)法可用于鑒定細(xì)胞的專屬特性。重組細(xì)胞、干細(xì)胞等的鑒別可采用此法。
7.免疫熒光法
免疫熒光法可用于鑒別部分種屬細(xì)胞、鑒定細(xì)胞的專屬特性。
8.細(xì)胞形態(tài)鑒別
通過(guò)對(duì)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài)的觀測(cè)簡(jiǎn)單判斷細(xì)胞系的來(lái)源。