1、適用范圍:
本方法適用于(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ號(hào))等油溶性非食用色素的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。
2、樣品處理:
取約1克樣品于容器中,加入2ml純凈水或蒸餾水,加入2~4 ml乙酸乙酯(環(huán)己烷、正己烷等有機(jī)溶劑都可以),充分震蕩1分鐘以上,靜置3分鐘以上。如果下層(水層)洗脫液有顏色,說(shuō)明樣品中含有水溶性色素,可選用水溶性非食用色素速測(cè)盒加以檢測(cè);如果上層(有機(jī)溶劑層)洗脫液有顏色,說(shuō)明樣品中含有油溶性色素,需要繼續(xù)往下操作。
3、點(diǎn)樣:
取一張層析紙,在端底向上約25px處、平行相隔約25px、用鉛筆畫(huà)出將要點(diǎn)樣的+字線或五個(gè)小點(diǎn)。取1支毛細(xì)管沾取樣品上層(有機(jī)溶劑層)洗脫液,將其點(diǎn)在1號(hào)+字線上(樣品溶液顏色較淺時(shí),可多次間斷性重復(fù)點(diǎn)樣,點(diǎn)樣斑點(diǎn)直徑控制在5毫米以?xún)?nèi))。另取四支毛細(xì)管分別沾取1、2、3、4號(hào)對(duì)照液少許依次分別點(diǎn)在其它+字線上。
4、展開(kāi):
取一個(gè)250ml以上的燒杯,加入約5ml展開(kāi)劑,將層析紙(樣品端朝下)插入展開(kāi)劑中靠在杯壁上,待展開(kāi)劑延層析紙向上平行展開(kāi)至層析紙頂端約1厘米處時(shí)取出層析紙。
5、結(jié)果判斷:
如果樣品在層析紙展開(kāi)軌跡中出現(xiàn)斑點(diǎn),其斑點(diǎn)展開(kāi)(向上跑)的距離與某一對(duì)照液展開(kāi)后的斑點(diǎn)距離相等、顏色相同或顏色雖淺卻相近時(shí),即可判斷樣品中含有這一色素。
6、說(shuō)明:
6.1 本方法檢出限為點(diǎn)樣量10 ul , 0.08 ug 目視可見(jiàn);檢出濃度8 ug /ml。精確定量需要采用高效液相色譜儀。
6.2 檢測(cè)的樣品數(shù)量較多時(shí),不必每張層析紙上都點(diǎn)對(duì)照液,可一次點(diǎn)幾個(gè)樣品,當(dāng)展開(kāi)過(guò)程中出現(xiàn)斑點(diǎn)后,再做加入對(duì)照液實(shí)驗(yàn)。
6.3 對(duì)照液的點(diǎn)樣量不要太多,以能夠展現(xiàn)斑點(diǎn)而無(wú)拖尾現(xiàn)象為宜。
6.4 展開(kāi)劑的使用應(yīng)適量,液面高度應(yīng)控制在斑點(diǎn)以下,展開(kāi)過(guò)程中層析紙不能傾倒,每展一張層析紙更換一次展開(kāi)劑。
6.5 樣品展開(kāi)時(shí),燒杯上不要蓋蓋,以便于斑點(diǎn)的展開(kāi)。當(dāng)環(huán)境溫度較高,展開(kāi)劑展開(kāi)到層析紙一半距離不再往上展時(shí),應(yīng)重新操作并在燒杯上加蓋物品。
6.6 保質(zhì)期1年,生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝處。
7、試劑盒組成:
層析紙1袋,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ號(hào)系列對(duì)照液1袋,展開(kāi)劑2瓶,毛細(xì)管1管。
8、自備試材:
樣品洗脫容器,250ml燒杯,乙酸乙酯或環(huán)己烷等某種有機(jī)溶劑。