產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：
產(chǎn)品英文名稱：Human GDF5 Protein
產(chǎn)品中文名稱：重組人生長(zhǎng)分化因子5（GDF5）
規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg
貨號(hào)：EY-01X8711
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):
標(biāo)簽:無(wú)標(biāo)簽
表達(dá)宿主:大腸桿菌
種屬:人
序列:氨基酸序列來(lái)源于：人源GDF5 (Ala382-Arg501)(P43026)表達(dá)的蛋白片段。
蛋白長(zhǎng)度：重組人 GDF5 由 120 個(gè)氨基酸組成，預(yù)計(jì)分子量為 13.5 kDa。
純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)
采用 LAL 法檢測(cè)，每 1 μg 蛋白質(zhì)中的 EU 含量小于 1.0。
產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無(wú)菌的 50 mM NaCl 40 mM Tris-HCl, pH 8.0溶液。
基因ID:8200
使用中注意事項(xiàng):開(kāi)蓋使動(dòng)?動(dòng)
背景
人類 GDF-5 在胚胎發(fā)育過(guò)程中表達(dá)于長(zhǎng)骨，出生后表達(dá)于關(guān)節(jié)軟骨。人類 GDF-5 基因突變與亨特-湯普森型侏儒癥和格雷比綜合癥有關(guān)，后者的特征是身材矮小、多指、四肢短小和畸形。成熟的功能型人 GDF-5 是由兩條 120 個(gè)氨基酸的多肽鏈（單體）通過(guò)一個(gè)二硫鍵連接而成的同源二聚體。重組人 GDF-5 是一種 27.0 kDa 的同源二硫鍵連接蛋白，由兩條 120 氨基酸的多肽鏈組成。
本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1.操作簡(jiǎn)便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。
2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：
CBX3/HP1 gamma 染色盒同源物3抗原 0.5mgCBX3/HP1 gamma 染色盒同源物3抗原
FABP6 Protein Human 重組人 FABP6 / I-BABP 蛋白
CD200R4重組小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白 Protein
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白
ACVR1重組人 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 Protein
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humanHistamine,HISELISAKIT 人組胺(HIS)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-PL7-aibody檢測(cè)試劑盒人PL7抗體/抗蘇氨酰NA合成酶(PL7)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒20次
Humaumorspecificansplaationaigen,TSTAELISAKit人特異性移植抗原(TSTA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠α1微球蛋白(α1-MG)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠c-Jun基末端激酶(JNK)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： JNK ELISA Kit
Mouse hepatocyte growth factor (HGF) ELISA Kit 小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)檢測(cè)試劑盒
MouseEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 小鼠(EPI)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanvimein,VIMELISAKit人波形蛋白
通用型細(xì)胞粘附性(celladhesion)比色法檢測(cè)試劑盒50次
ELISAKitGHRP大鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽
重組人生長(zhǎng)分化因子5（GDF5）CD200R4重組小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白 Protein
CBX3/HP1 gamma 染色盒同源物3抗原 0.5mgCBX3/HP1 gamma 染色盒同源物3抗原
ACVR1重組人 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 Protein
FABP6 Protein Human 重組人 FABP6 / I-BABP 蛋白
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白
操作步驟：
(一)獲得目的基因
1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體
1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。
3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。
(四)誘導(dǎo)表達(dá)
1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
