產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：
產(chǎn)品英文名稱：Rat SCF Protein, His tag
產(chǎn)品中文名稱：重組大鼠干細胞因子，His-標簽（SCF）
規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg
貨號：EY-01X8843
用途：僅供科研研究實驗
特點&優(yōu)勢:
序列:氨基酸序列來源于：大鼠源SCF P21581-1 (Q26-A189）表達的蛋白片段。
活性:Testing in progress.
蛋白長度：重組大鼠 SCF由170個氨基酸組成，預(yù)測分子量為18.47 kDa。
純度:> 99% ，使用SDS-PAGE檢測
通過LAL法測定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<1 EU。
產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無菌的20 mM Tris，150 mM NaCl，pH 7.4。
使用中注意事項:開蓋使用前，請先離心。本產(chǎn)品為凍干粉，推薦用該產(chǎn)品配套的Reconsti動?動
背景
Stem cell factor (SCF), as a key ligand of KIT, regulates cell survival, proliferation, hematopoiesis, stem cell maintenance, gametogenesis, mast cell development, migration, and melanogenesis. Binding to KIT activates signaling pathways involving phosphorylation events, key kinases (AKT1, RAS, RAF1, MAPK1/ERK2, MAPK3/ERK1), STAT family members, and PLCG1. SCF Protein, Rat (His) is the recombinant rat-derived SCF protein, expressed by E. coli with C-6*His labeled tag.
本產(chǎn)品具有下列特點:
1.操作簡便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。
2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
操作步驟：
(一)獲得目的基因
1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構(gòu)建重組表達載體
1、載體酶切:將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達質(zhì)粒的表達菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。
3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。
(四)誘導表達
1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導的對照組,余下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
公司正在出售的產(chǎn)品：
c-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原 0.5mgc-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原)
CMBL Protein Human 重組人 CMBL 蛋白
MBL1重組小鼠 MBL1 蛋白 Protein
CD28 Protein Mouse 重組小鼠 CD28 蛋白 (His & Fc 標簽)
CCL7重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 Protein
小鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human immunoglobulin A, Fc segme receptor (Fc alpha R I /CD89) ELISA Kit A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)檢測試劑盒
HumanHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 人高遷移率族蛋白1(HMG-1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
Elisa抗原2板檢測試劑盒2*96孔2*96孔
真菌/酵母a-(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量檢測試劑盒20次
MouseCTX-2ELISAKit小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠狀腺原酸檢測試劑盒 小鼠狀腺原酸試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠狀腺原酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠狀腺原酸試劑盒、小鼠狀腺原酸檢測試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。
小鼠硫氧還蛋白還原酶檢測試劑盒 小鼠硫氧還蛋白還原酶試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠硫氧還蛋白還原酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠硫氧還蛋白還原酶試劑盒、小鼠硫氧還蛋白還原酶檢測試劑盒 動?動
大鼠己糖激酶1(HK1)檢測試劑盒 ，英文名： HK1 ELISA Kit
Mouse tumor necrosis factor soluble receptor II (TNFsR- II) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)檢測試劑盒
Ratai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit 大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFE(Humanferritin)ELISAKit人鐵蛋白
細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)明膠法比色定量檢測試劑盒20次
RatN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
重組大鼠干細胞因子，His-標簽（SCF）MBL1重組小鼠 MBL1 蛋白 Protein
c-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原 0.5mgc-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原)
CCL7重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 Protein
CMBL Protein Human 重組人 CMBL 蛋白
CD28 Protein Mouse 重組小鼠 CD28 蛋白 (His & Fc 標簽)
