低生長因子無酚紅基質膠是一種可溶性的基底膜基質膠，這種基質是通過基因編輯技術將多種表達膠原蛋白的基因序列插入到經永生化處理的小鼠細胞體系中，并在實體中抽提出來的。它的主要成分是層粘連蛋白，接著是膠原蛋白IV、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和巢蛋白?；啄せ|也含有轉化生長因子β、表皮生長因子、類胰島素生長因子、成纖維細胞生長因子和在中自然出現的其他生長因子

推薦應用

     除了可以應用?；飿藴市突|膠適用的應用外，它還適用于對基底膜制備要求較高的研究應用，如管狀骨細胞信號優(yōu)化的研究。它也被用于研究原代小鼠哺乳動物上皮細胞的基因表達(減少生長因子誘導的背景信號)。

產品信息

產品參數

來源：小鼠

外觀：①顏色：含酚紅基質膠表現為黃色-粉紅色，無酚紅基質膠表現為半透明淡黃色； ②形態(tài)：標準型基質膠4℃溶解后，呈透明流動液態(tài)狀態(tài)；高濃度基質膠0℃溶解后，呈透明流動液態(tài)狀態(tài)，4℃久置呈半凝膠狀。

濃度多樣性： 蛋白濃度范圍在8~26mg/mL之間

內毒素： ≤ 4.5EU/ mL

凝膠時間：室溫條件下5-30min凝膠，溫度22°C至37°C時成膠速度加快

2D/3D應用非常廣泛：干細胞研究(分化、維持）、研究（侵襲）、 3D細胞培養(yǎng)（類器官、3D細胞球）、體內植入（皮下成瘤、血管生成、栓塞）

產品質量控制規(guī)范

• 通過小鼠抗體產物（MAP）檢測進行常規(guī)小鼠菌落病原體篩選

• 提取自不含LDEV的小鼠細胞

• 對包括LDEV在內的多種病原體進行廣泛的PCR檢測， 確保對生產過程中使用的原材料進行嚴格控制

• 對細菌、真菌和支原體進行檢測，確保陰性

• 使用BCA方法測定蛋白濃度

• 使用血清學方法檢測內毒素水平

• 在37℃下進行14天的凝膠穩(wěn)定性測試

• 每批次產品進行生物學功能驗證（類器官培養(yǎng)與分化實驗；皮下成瘤實驗；干細胞培養(yǎng)；血管生成實驗等）

• 對包括LDEV在內的多種病原體進行廣泛的PCR檢測， 確保對生產過程中使用的原材料進行嚴格控制

使用注意事項

實驗環(huán)境

 • 環(huán)境溫度：20–25℃ ；環(huán)境濕度：40–60%。

 • 請穿戴個人防護裝置，注意實驗室安全。

溫度控制  

• 基質膠產品儲存在-20℃時是穩(wěn)定的。通過分裝并一次性使用分裝物來盡可能減少產品的凍融次數。在-20℃冰箱中儲存分裝物直到準備使用。請不要儲存在無霜冰箱中。請務必保持產品的凍存狀態(tài)。

• 因為模基生物低生長因子無酚紅基質膠在10℃以上會開始凝膠化。所以需謹記：?；?strong>低生長因子無酚紅基質膠和所有與?；?strong>低生長因子無酚紅基質膠接觸的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基都應該預冷。在實驗的全部過程中請務必保持?；?strong>低生長因子無酚紅基質膠處于冰上。

避免污染

• 實驗操作人員需嚴格區(qū)分實驗操作臺、清潔區(qū)和污染區(qū)，確保插取吸頭、加樣、丟棄吸頭的動作呈單向流動。

• 實驗后使用含 0.5% 次氯酸的消毒液對實驗操作區(qū)消毒。

其他

• 請將基質膠產品小瓶淹沒在碎冰中，并放置在4℃冰箱里過夜解凍?；锘|膠，蛋白濃度高時可能需要更多時間。請將?；?strong>低生長因子無酚紅基質膠全程保持在冰上。無論是開蓋取用產品或者對產品進行分裝，請保持無菌操作。

• 操作過程中，需使用預冷的移液管輕柔地吹打混勻?；?strong>低生長因子無酚紅基質膠以確保其均勻性。將?；?strong>低生長因子無酚紅基質膠分裝到離心管中，每當?；?strong>低生長因子無酚紅基質膠堵塞吸頭和/或移液管測量不精確時請更換吸頭。如果將產品放置在4℃的冰上 24-48個小時，凝膠化的?；?strong>低生長因子無酚紅基質膠可能會被重新水化。

操作說明

分裝操作說明

    基質膠產品儲存在-20℃時是穩(wěn)定的。通過分裝并一次性使用分裝物來盡可能減少產品的凍融次數。以下為實驗操作者進行分裝操作說明。

1.將基質膠置于預冷盒或碎冰中，放入 4℃冰箱，過夜解凍。

2.將無菌離心管、無菌槍頭等接觸基質膠的耗材放預冷盒中或冰箱中預冷，分裝前將融化好的基質膠表面清潔后放入預冷盒或碎冰上。

3.在潔凈工作臺中，用1mL移液槍吸取250µL基質膠到離心管里(或根據每次用量多少進行分裝)，標注好信息，操作過程中盡量保持低溫，縮短操作時間。

4.分裝完成后放冰盒中，防止傾倒，并于冰箱保存。分裝后放置于-20℃冰箱中儲存?zhèn)溆?。請不要儲存在自動除霜的冰箱中儲存。使用前將基質膠插入預冷盒或碎冰中，并放置于4°C冰箱中，在冰上過夜解凍，使基底膜基質膠在穩(wěn)定的低溫環(huán)境中緩慢充分融化。

使用方法說明

包被涂層方法   

    ?；?strong>低生長因子無酚紅基質膠可以以幾種方式使用。薄層凝膠法適用于在凝膠頂部接種細胞，厚層凝膠法允許您在三維基質內培養(yǎng)細胞，薄層包被法(不凝膠化)給您提供了復雜的蛋白質層，您可以在其上培養(yǎng)細胞。您的選擇基于您想要實現的最終結果，無論是細胞生長、附著還是分化。

一、薄層凝膠法

1.依照推薦的方法解凍模基生物基底膜基質。使用預冷的移液管，將模基生物 基底膜基質混合至均勻。

2.將培養(yǎng)板放置在冰上，以 50 µl/cm2 向生長表面加入模基生物 基底膜基質。

3.將培養(yǎng)板放置在 37 ℃，30 分鐘。

4.如果有必要的話，請在使用無血清培養(yǎng)基輕柔漂洗前吸出未結合的材料。請確保移液器的吸頭不要刮擦包被的表面。培養(yǎng)板現在可以使用了。

二、薄層包被法

1.依照推薦的方法解凍?；锘啄せ|。使用預冷的移液管，將?；?基底膜基質混合至均勻。

2.使用無血清培養(yǎng)基將?；锘啄せ|稀釋到需要的濃度。對于您的實驗應用，您應該完成以經驗為主的研究來確定您的最適包被濃度。

3.向被包被的容器中加入稀釋的?；?基底膜基質。加入的量應該足以容易地覆蓋整個生長表面。在室溫下培養(yǎng) 1 個小時。

4.吸出未結合的材料并使用無血清培養(yǎng)基輕柔地漂洗。培養(yǎng)板現在可以使用了。

三、厚層凝膠法

1.依照推薦的方法解凍模基生物基底膜基質。使用預冷的移液管，將?；?基底膜基質混合至均勻。

2.將培養(yǎng)板放置在冰上。向?；锘啄せ|中加入細胞并使用預冷的移液管懸浮。以150-200µl/cm2 向生長表面加入?；?基底膜基質。

3.將培養(yǎng)板放置在37℃，30分鐘?，F在可以添加培養(yǎng)基了。細胞也可以培養(yǎng)在這一凝膠的頂部。

細胞復蘇：

   使用細胞復蘇溶液在冰上 7 小時內解聚?；锘啄せ|能夠實現將生長在?；锘啄せ|上的細胞zuiyouxiao地復蘇，或者使用zhongxingdanbaimei，考慮到連續(xù)培養(yǎng)，zhongxingdanbaimei作為一種金屬酶可以分散細胞