抗菌試驗(yàn)是通過模擬實(shí)際使用條件,對材料進(jìn)行抗菌處理,并觀察細(xì)菌在處理前后的數(shù)量變化,以此來評估材料的抗菌效果??咕囼?yàn)可分為體外抗菌試驗(yàn)和體內(nèi)抗菌實(shí)驗(yàn),下面跟著中科檢測小編一起來看下體外抗菌試驗(yàn)。
體外抗菌試驗(yàn)-殺菌檢測報(bào)告-中科檢測
體外抗菌實(shí)驗(yàn)方法
1、OD值測試(適合無顏色干擾、可溶性樣品);
2、抑菌圈測試(適合活性成分可以溶出的樣品);
3、振蕩培養(yǎng)+平板涂布計(jì)數(shù)法(可用于不溶性樣品抗菌活性評價(jià));
4、MIC測試(適合已驗(yàn)證過具有抗菌活性且無顏色干擾的可溶性樣品);
5、MBC測試(適合已檢測過具有最小抑菌濃度的樣品);
如果之前沒有做過抗菌實(shí)驗(yàn),建議先做簡單的抑菌圈或者OD值評估下抗菌效果。
體外抗菌實(shí)驗(yàn)樣品要求
1、抑菌圈測試
1.1塊體類-薄膜、布料、金屬塊、紙片、凝膠等
送樣量:至少3個(gè)/種菌。
制樣要求:金屬塊、凝膠類樣本須制備成統(tǒng)一大小的圓形/方形,建議制備直徑為6-10 mm圓形。布料、紙片類樣本可代為裁剪,默認(rèn)制備直徑為6 mm。
注:凝膠樣本須保證樣本在培養(yǎng)條件下(一般為37℃)不融化。
1.2液體類
送樣量:根據(jù)測試時(shí)樣本濃度而定
①若采用原液測試,則樣本量為1 mL/種菌;
②若采用稀釋后樣本測試,則須告知稀釋倍數(shù)及稀釋液,樣本量為1 mL/稀釋倍數(shù)/種菌。
1.3粉末類
送樣量:因不同樣本密度不同,無法保證每個(gè)加樣孔均能加入等量樣本,故建議樣本做分散液,按照等體積加樣(每個(gè)孔最大加樣量為0.2 mL),能提升樣本量的一致性。需要提供質(zhì)量/體積比(選擇合適的樣本分散液),樣本量為質(zhì)量/體積×1 mL/種菌。
如果不可使用分散液,需要預(yù)試,樣本量可聯(lián)系本公司人員確認(rèn)。
2、OD值測試
2.1塊體類-薄膜、布料、金屬塊、紙片、凝膠等
送樣量:需要提供樣本與菌液的培養(yǎng)體系。比如X g樣本/mL菌液,樣本量為4X g/種菌。
2.2液體類(要求樣本溶液無色或者淡色)
送樣量:根據(jù)測試時(shí)樣本的溶劑和濃度而定
①若溶劑具備殺菌性(如DMSO、乙醇、甲醇、DMF等),推薦提供樣本濃度為50倍測試濃度,樣本量為0.1 mL/種菌。
舉例:測試材料的溶劑為DMSO,測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為100 mg/mL濃度的樣本0.1 mL/種菌。
②若溶劑不具備殺菌性(如PBS、純水、生理鹽水等),推薦提供樣本濃度為10倍測試濃度,樣本量為0.4 mL/種菌。
舉例:測試材料的溶劑為純水,測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為20 mg/mL濃度的樣本0.4 mL/種菌。
注:如果提供樣本原液濃度高于推薦濃度,可按比例計(jì)算樣本量。
2.3粉末類
送樣量:需要提供樣本與菌液的培養(yǎng)體系。比如X g樣本/mL菌液,樣本量為4X g/種菌。
3、平板涂布計(jì)數(shù)測試
3.1塊體類-薄膜、金屬塊、鍍膜玻璃等(具備一定的表面積)
測試方法參考國標(biāo)GBT 31402-2015 塑料 塑料表面抗菌性能試驗(yàn)方法、JCT 1054-2007 鍍膜抗菌玻璃。
送樣量:樣本量為1個(gè)/次重復(fù)/種菌
樣本尺寸:標(biāo)準(zhǔn)尺寸大小5×5cm,建議最小尺寸1×1cm
3.2液體類
送樣量:根據(jù)測試時(shí)樣本的溶劑和濃度而定
①若溶劑具備殺菌性(如DMSO、乙醇、甲醇、DMF等),推薦提供樣本濃度為50倍測試濃度,樣本量為0.03 mL/次重復(fù)/種菌。
舉例:測試材料的溶劑為DMSO,測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為100 mg/mL濃度的樣本0.03 mL/次重復(fù)/種菌。
②若溶劑不具備殺菌性(如PBS、純水、生理鹽水等),推薦提供樣本濃度為10倍測試濃度,樣本量為0.1 mL/次重復(fù)/種菌。
舉例:測試材料的溶劑為純水,測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為20 mg/mL濃度的樣本0.1 mL/次重復(fù)/種菌。
3.3粉末類
送樣量:需要提供樣本與菌液的培養(yǎng)體系。比如X g樣本/mL菌液,樣本量為X g/次重復(fù)/種菌。
4、MIC/MBC測試
4.1粉末/液體類(要求樣本溶液,溶解且無色或者淡色)-微孔板法
送樣量:根據(jù)測試時(shí)樣本的溶劑和初始工作濃度而定
①若溶劑具備殺菌性(如DMSO、乙醇、甲醇、DMF等),推薦提供樣本濃度為50倍測試濃度,樣本量為0.03 mL/種菌。
舉例:測試材料的溶劑為DMSO,測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為100 mg/mL濃度的樣本0.03 mL/種菌。
②若溶劑不具備殺菌性(如PBS、純水、生理鹽水等),推薦提供樣本濃度為10倍測試濃度,樣本量為0.1 mL/種菌。
舉例:測試材料的溶劑為純水,測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為20 mg/mL濃度的樣本0.1 mL/種菌。
注:如果提供樣本原液濃度高于推薦濃度,可按比例計(jì)算樣本量。
如果樣本為粉末,可按照濃度和所需體積計(jì)算樣本量(<10 mg者,需稱量并標(biāo)記清楚,避免樣本量較少情況下再反復(fù)稱量造成損耗)。
4.2粉末/液體類(樣本顏色較重)-平板法
送樣量:根據(jù)測試時(shí)樣本工作濃度和濃度個(gè)數(shù)而定。比如工作濃度為X g/mL(或?M),測試n個(gè)濃度,樣本量為60X*n g(或10X ?M的液體樣本6*n mL)
4.3液體類(樣本屬于分散液或制備成分散液,且呈無色或者淡色)-試管法
送樣量:根據(jù)測試時(shí)樣本工作濃度而定
①若分散劑具備殺菌性(如DMSO、乙醇、甲醇、DMF等),推薦提供樣本濃度為50倍測試濃度,樣本量為2 mL/種菌。
舉例:測試材料的分散劑為DMSO,測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為100 mg/mL濃度的樣本2 mL/種菌。
②若分散劑不具備殺菌性(如PBS、純水、生理鹽水等),推薦提供樣本濃度為10倍測試濃度,樣本量為10 mL/種菌。
舉例:測試材料的分散劑為純水,測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為20 mg/mL濃度的樣本10 mL/種菌。
4.4粉末類(直接加樣)-試管法
送樣量:根據(jù)測試時(shí)樣本的工作濃度而定。比如工作濃度為X mg/mL(g/mL),則樣品量為30X mg(g)/種菌。
體外抗菌試驗(yàn)-殺菌檢測報(bào)告-中科檢測