尿素酶 詳細(xì)資料:
概述
尿素酶是一種人和動(dòng)物胃腸道及泌尿道細(xì)菌感染中常見的酶,它既是人和動(dòng)物中某些致病菌的致病因子之一,又是某些氮源性*物轉(zhuǎn)化所必須具備的酶之一. 它是人類*獲得晶體并發(fā)現(xiàn)含有Ni離子的金屬酶〔7〕。 又名脲酶,詳見百科“脲酶”詞條。編輯本段的理化性狀 Hp除有的一般理化性狀外,還有其*性. Hp分子量為550KDa左右,直徑13nm,等電點(diǎn)5.99±0.03,zui適溫度45℃,zui適pH 8.2. Km值0.3mmol/L±0.1mmol/L,在飽和條件下純化的活性為每毫克蛋白質(zhì)每分鐘水解1100μmol±?200μmol尿素,較低Km值有助于Hp的在尿素濃度較低的人胃環(huán)境中始終處于飽和狀態(tài)而發(fā)揮zui大的功能. Hp單體由A,B兩個(gè)亞單位組成,呈六聚體,A,B兩個(gè)亞單體的Mr分別為30000和64000左右,其比例為1∶1,而其他菌屬所含則有三個(gè)亞單位組成. Hp的量很大,占全菌蛋白的5%~10%. 一般為胞質(zhì)蛋白,而Hp具有大量高活性的胞外,Hp產(chǎn)生的活性相當(dāng)于奇異變形桿菌的2倍,陽(yáng)性腸道菌的7倍,故活性的測(cè)定可以作為Hp的快速診斷方法。編輯本段大豆粕中的測(cè)定:測(cè)定方法1
方法名稱:尿素— *紅法(美國(guó)大豆協(xié)會(huì)) 1 原理 活性是大豆餅粕類加工正確與否的標(biāo)志,它的活性的高低與大豆餅粕加工(熱)程度有直接關(guān)系,此方法是在指示劑*磺存在的條件下,按尿素轉(zhuǎn)變成氨的方法定性測(cè)定豆粕中的活性。 2 試劑 ?。?)0.1mol/L硫酸(將6ml濃硫酸緩緩注入1000ml水中) ?。?)0.2mol/L氫氧化鈉:取0.8g氫氧化鈉加蒸餾水,溶解成100ml ?。?)尿素— *紅(別名:酚磺肽、酚紅)試劑:將 1.2g*紅溶于30mL0.2mol/L氫氧化鈉溶液中,用蒸餾水稀釋至300mL;加入90g尿素并溶解之,用蒸餾水稀釋至 2L;加 70mL0.1mol/L硫酸;稀釋至3L。 注意:配好的溶液應(yīng)具有明亮的琥珀色,若溶液轉(zhuǎn)變成桔紅色時(shí),應(yīng)滴加0.1mol/L硫酸,調(diào)至呈琥珀色,試劑在試驗(yàn)前配制,現(xiàn)配現(xiàn)用。尿素—*紅試劑有效期僅90天。 3.測(cè)定方法 (1)取粉碎好的豆粕,均勻地平鋪于培養(yǎng)皿中(注意鋪薄薄一層)。 ?。?)用滴管吸取尿素— *紅試劑,小自心滴在被測(cè)定的樣品中,將培養(yǎng)皿中豆粕全部浸濕。 ?。?)放置5分鐘后觀察結(jié)果: ?、?zèng)]有任何紅點(diǎn)出現(xiàn),再放置25分鐘,若還無紅點(diǎn)出現(xiàn),說明沒有活性,是豆粕加工過熟了。 ②有少數(shù)紅點(diǎn),為少量活性,豆粕可用。 ③豆粕表面有25%的紅點(diǎn)覆蓋,有少量活性,可用。 ④豆粕表面出現(xiàn)50%的紅點(diǎn)覆蓋,活性大,應(yīng)慎用。 ?、荻蛊杀砻娴?75%一*為紅點(diǎn)覆蓋,活性很高,說明豆粕過生,無法使用。
測(cè)定方法2
名稱:酚紅指示劑 1、原理 酚紅指示劑在PH6.4—8.2時(shí)由黃變紅,大豆制品中所含的,在室溫下可將尿素水解,產(chǎn)生氨,釋放的氨可使酚紅指示劑變紅,根據(jù)變紅時(shí)間長(zhǎng)短來判斷活性大小。 2、儀器和試劑 ?。?) 粉碎裝置:粉碎時(shí)應(yīng)不產(chǎn)生強(qiáng)烈發(fā)熱(如研體球磨機(jī)) ?。?) 天平:感量0.01g (3) 試管:直徑1.8cm,長(zhǎng)15cm ?。?) 尿素:分析純 ?。?) 酚紅:分析純、0.1%乙醇(20%)溶液 3、測(cè)定步驟 將試樣研細(xì),稱取0.02g試樣,稱準(zhǔn)至0.01g重,轉(zhuǎn)入試管中,加入0.02g結(jié)晶尿素及兩滴酚紅指示劑,加20—30mL蒸餾水,搖動(dòng)10s鐘。觀察溶液顏色,并記下呈粉紅色的時(shí)間。 4、活性的測(cè)定結(jié)果表示: ?。?)1分鐘內(nèi)呈粉紅色為活性很強(qiáng)。 ?。?)1—5分鐘內(nèi)呈粉紅色為活性強(qiáng)。 ?。?)5—15 分鐘內(nèi)呈粉紅色為有點(diǎn)活性。 (4)15—30分鐘內(nèi)呈粉紅色為沒有活性。 通常10分鐘以上不顯粉紅色或紅色的大豆制品,其活性即可認(rèn)為合格。
產(chǎn) 品 名 稱 | 產(chǎn)品貨號(hào) | 規(guī)格(ml) | 產(chǎn)品說明及用途 |
GB006 | 20支 | / |
相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn) 品 名 稱 | 規(guī)格(ml) | 產(chǎn)品說明及用途 |
皰肉牛肉粒 | 100 | 加入皰肉基礎(chǔ),配成皰肉培養(yǎng)基 |
Dried Meat Particle | ||
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ) | 250 | 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MercK標(biāo)準(zhǔn)) |
Buffered Listeria Enrichment Broth | ||
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)添加劑 | 1ml*5支 | 每支加入225ml緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)中 |
Buffered Listeria Enrichment Broth Supplement | ||
PALCAM 瓊脂 | 250 | 用于單增李氏菌選擇性分離 |
PALCAM Agar | (FDA標(biāo)準(zhǔn)) | |
PALCAM添加劑 | 1mg/支*10 | 添加到HB4188中,用于李氏菌的選擇性分離培養(yǎng) |
PALCAM Supplement | ||
LPM瓊脂 | 250 | 用于單增李氏菌選擇性分離(加入七葉苷和檸檬酸鐵銨)(FDA標(biāo)準(zhǔn)) |
LPM Agar | ||
Half –Fraser 培養(yǎng)基 | 250 | 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標(biāo)準(zhǔn)) |
Half-Fraser Medium | ||
Half –Fraser 添加劑 | 5ml*2 | 添加到HB4190中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng) |
Half-Fraser Supplement | ||
改良緩沖蛋白胨水(MBP) | 250 | 用于單增李氏菌前增菌培養(yǎng) |
Modified Buffered Peptone Water | (SN標(biāo)準(zhǔn)) | |
EB增菌液 | 250 | 用于單增李氏菌選擇性增菌培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn)) |
EB Enrichment Broth | ||
Fraser 培養(yǎng)基 | 250 | 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標(biāo)準(zhǔn)) |
Fraser Medium | ||
Fraser 添加劑 | 5ml*2支 | 添加到HB4193中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng) |
Fraser Supplement | ||
UVM培養(yǎng)基 | 250 | 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標(biāo)準(zhǔn)) |
UVM Medium | ||
UVM 添加劑1 | 1ml*10支 | 添加到HB4195中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng) |
UVM Supplement1 | ||
LM-137瓊脂 | 250 | 用于膜濾法單增李氏菌選擇性分離(NEOGEN標(biāo)準(zhǔn)) |
LM-137 Agar |
現(xiàn)貨供應(yīng),咨詢。