T細胞白血病細胞人胚膀胱組織來源細胞在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)的懸浮期.此時,細胞質(zhì)回縮,胞體呈圓球形.然后細胞貼附于載體表面,稱貼壁,懸浮期結(jié)束. 細胞貼壁速度與細胞種類,培養(yǎng)基成分,載體的理化性質(zhì)等密切相關(guān)。一般情況下,原代培養(yǎng)細胞貼壁速度慢,可達0-24 小時或更多,而傳代細胞系貼壁速度快,通常0-30 分鐘即可貼壁。細胞貼壁后還需經(jīng)過一個潛伏階段,才進入生長和增殖期.原代培養(yǎng)細胞潛伏期,約24-96 小時或更長,連續(xù)細胞系和腫瘤細胞潛伏期短,僅需6-24 小時。
細胞指數(shù)增生期(logarithmic growth phase) 這是細胞增殖zui旺盛的階段,分裂相細胞增多。指數(shù)增生期細胞分裂相數(shù)量可作為判定細胞生長是否旺盛的一個重要標(biāo)志。通常以細胞分裂相指數(shù)(Mitotic index,MI)表示,即細胞群中每000 個細胞中的分裂相數(shù)。一般細胞的分裂指數(shù)介于0.%-0.5%,原 代細胞分裂指數(shù)較低,而連續(xù)細胞和腫瘤細胞分裂相指數(shù)可高達3%-5%。T細胞白血病細胞指數(shù)增生期的細胞是細胞活力時期,是進行各種實驗*時期,也是凍存細胞的時機。在接種細胞數(shù)量適宜情況下,指數(shù)增生期持續(xù)3-5 天后,隨著細胞數(shù)量不斷增多、生長空間減少,zui后細胞相互接觸匯合成片。
正常細胞相互接觸后能抑制細胞運動,這種現(xiàn)象稱接觸抑制現(xiàn)象(contact inhibition)。而惡性腫瘤細胞無接觸抑制現(xiàn)象,能繼續(xù)移動和增殖,導(dǎo)致細胞向三維空間擴展,使細胞發(fā)生堆積(piled up)。細胞接觸匯合成片后,雖然發(fā)生接觸抑制,但只要營養(yǎng)充分,細胞仍能進行增殖分裂,因此細胞數(shù)仍然在增多。但是,當(dāng)細胞密度進一步增大,培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分減少,代謝產(chǎn)物增多時,細胞因營養(yǎng)枯竭和代謝產(chǎn)物的影響,導(dǎo)致細胞分裂停止,這種現(xiàn)象稱密度抑制現(xiàn)象(Density Inhibition)。
培養(yǎng)細胞注意事項:
實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)0分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)0分鐘以上后,再進行下一個細胞株之操作。
無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置,其它實驗用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實驗用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在抬面之無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。
小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
工作人員應(yīng)注意自身之安全,須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染之細胞株應(yīng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃壷疅o菌操作臺(至少ClassⅡ)。操作過程中,應(yīng)避免引起aerosol之產(chǎn)生,小心毒性藥品,例如DMSO及TPA等,并避免尖銳針頭之傷害等。
公司其他類型產(chǎn)品信息:suan"性品紅,復(fù)紅,-氨基-5-[(4-氨基-3-磺ben"基)(4-亞氨基-3-磺基-,5-環(huán)己二烯--亞基)甲基]-3-甲基ben"磺suan"二鈉鹽,品紅S,suan"性紫9,F(xiàn)uchsin acid
紅四氮唑,,3,5-三ben"基lv"化四氮唑,,3,5-lv"化三ben"基四氮唑,lv"代三ben"基四氮唑,四氮唑紅,紅四唑,lv"化-,3,5-三ben"基四氮唑,lv"化三ben"基四氮唑,TTC,TPTZ,TTZ,RT
四氮唑紫,四唑紫,,5-二ben"基-3-(-萘基)-H-四唑鎓lv"化物,TV
四氮唑藍,四唑藍,藍四氮唑,四氮唑蘭,藍四唑,lv"化四唑藍,lv"化藍四氮唑,3,3'-[3,3'-二甲氧基-,'-聯(lián)ben"-4,4'-二基]-雙(,5-二ben"基-H-四唑)lv"化物,lv"化四氮唑蘭,BTC,BT
中性紅,堿性紅5,-甲基-3-氨基-6-二甲氨基二氮雜蒽鹽suan"鹽,3-氨基-6-二甲氨基--甲基吩嗪鹽suan"鹽,Neutral red
甲基紅,甲紅,烷紅,甲烷紅,對二甲氨基偶氮ben"鄰羧suan",suan"性紅,-[[4-(二甲基氨基)ben"基]偶氮基]ben"甲suan",MR
甲基紅鈉,甲基紅鈉鹽,-[4-(二甲基氨基)ben"基偶氮]ben"甲suan"鈉鹽,水溶性甲基紅,對二甲氨基偶氮ben"鄰羧suan"鈉,Methyl red sodium salt
剛果紅,直接剛果紅,煮大紅,棉紅,直接朱紅,直接大紅,二ben"基-4,4′-二[(偶氮)--氨基萘-4-磺suan"鈉],直接紅8,3,3'-[[,'-聯(lián)ben"]-4,4'-基雙(偶氮)]雙(4-氨基萘--磺suan")二鈉,Congo red