商品介紹：
AlamaBlue 細胞活力檢測試劑盒提供了一種可靠、靈敏、安全和低成本的快速有效檢測細胞活力與毒性的方法。AlamaBlue 通過在細胞生長的培養(yǎng)基中所產(chǎn)生的化學還原反應，將非熒光信號的染料轉(zhuǎn)換成為一紅色熒光物質(zhì)，試鹵靈（9-羥基-3-異吩惡嗪酮7-羥基-3H-吩惡嗪-3-酮），從而檢測細胞的存活率。維持細胞生產(chǎn)需要還原性環(huán)境而抑制生長則表現(xiàn)為氧化型環(huán)境。細胞生長率相關的降低可表現(xiàn)為氧化還原指示劑從氧化型（非熒光素、紫色）轉(zhuǎn)為還原型（熒光素、紅色）。該熒光信號可以用530~560nm 的激發(fā)波激發(fā)，在590nm 處可以獲發(fā)射波，檢測570 和600nm 的的吸光度值，校正監(jiān)測值，可以減去相應的570nm 和600nm 的背景吸光度值。檢測所產(chǎn)生的熒光信號是與樣品中的活細胞數(shù)成正比的。
商品屬性：
貨號 | 規(guī)格 | 貨期 | 英文名稱 |
CS-C6092 | 500T | 1～3天 | AlamaBlue Cell Viability Assay Kit |
AlamaBlue 細胞活性檢測試劑盒的靈敏度相似于[3H]胸苷法檢測細胞增殖法。根據(jù)不同類型的細胞，AlamaBlue 可以檢測到至少40個細胞，同時保證很好的重現(xiàn)性和靈敏度。作為試鹵靈（紫紅、紅色熒光）可以進一步被還原為水解化的試鹵靈（無色、無熒光），當細胞數(shù)量增多，所有的刃天青（7-羥基-3-羰基-10-氧化-三氫吩惡嗪）被轉(zhuǎn)換為試鹵靈（9-羥基-3-異吩惡嗪酮7-羥基-3H-吩惡嗪-3-酮），試劑盒的信號反而會發(fā)生衰減。因此，對于您所用的試劑盒來說，針對不同的細胞類型，應該調(diào)整您的細胞數(shù)，做相應的優(yōu)化，才能得到更好的結果。
操作說明
以下操作可用作通用指導建議?？紤]不同細胞類型與培養(yǎng)條件的差異性，有必要根據(jù)實際情況優(yōu)化您的操作步驟。
1. 96 孔細胞培養(yǎng)板每孔100μL 培養(yǎng)基飼養(yǎng)細胞，控制細胞數(shù)目在40~10000 個/貼壁細胞，2000~500000 個/懸浮細胞。設置空培養(yǎng)基做對照。
2. 加入10μL AlamaBlue 溶液至培養(yǎng)基中，37 度孵育：24 小時（比色法讀數(shù)）；5-6 小時（熒光讀數(shù)）。
3. 檢測570nm 和600nm 的吸光度，或者用熒光微孔板讀數(shù)530nm 激發(fā)，590nm 發(fā)射波讀數(shù)。
4. 如果采用比色法檢測，選擇OD570-OD600 檢測，如果檢測熒光信號，請在校正OD 值后，先設置標準曲線，選擇合適您實驗的細胞濃度。
步驟和注意事項：?
準備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?
細胞培養(yǎng)：?
準備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?
取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?
用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?
將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?
細胞凍存與復蘇：?
細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?
復蘇則是將凍存的細胞系恢復到常溫的過程，?原則是“慢凍快融”，?以較大限度地保存細胞活力。?
細胞計數(shù)：?
制備細胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞，?制成單個細胞懸液。?
在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細胞數(shù)，?細胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?
熒光顯微鏡使用：?
使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細胞結構和功能。?
聚合酶鏈反應（?PCR）?：?
準備PCR反應所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?
按照PCR反應液配制表制備反應液。?
在反應器中加入反應液，?開始PCR反應。?
PCR反應的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?
轉(zhuǎn)染：?
準備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細胞。?
制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細胞混合均勻。?
處理轉(zhuǎn)染細胞，?并進行下一步實驗。?
在操作過程中，?應注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全
下列是公司正在出售的產(chǎn)品：
Annexin V-APC/PI雙染雙染細胞凋亡檢測試劑盒 | CCA 小鼠結腸癌抗原ELISA檢測試劑盒 |
Caspase 9熒光法檢測試劑盒(AFC) | OT 小鼠催產(chǎn)ELISA檢測試劑盒 |
CFDA,SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒 | SHBG 小鼠性激結合球蛋白ELISA檢測試劑盒 |
MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒 | Pentosidine 小鼠戊糖ELISA檢測試劑盒 |
Caspase3/7活細胞熒光實時法檢測試劑盒 | Collagenase II 小鼠膠原IIELISA檢測試劑盒 |
細胞凋亡DNA Ladder檢測試劑盒 | PP 小鼠蛋白磷ELISA檢測試劑盒 |
彗星電泳法檢測細胞損傷試劑盒 | GP-BB 小鼠糖原磷化同工BBELISA檢測試劑盒 |
羅丹明123染色試劑盒 | TLR-9/CD289 小鼠Toll樣受體9ELISA檢測試劑盒 |
細胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1) | Gzms-B 小鼠顆粒BELISA檢測試劑盒 |
細胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-10) | HBsAb 小鼠乙型肝炎表面抗體ELISA檢測試劑盒 |
活細胞/凋亡細胞/壞死細胞鑒別試劑盒(AO/EB法.熒光顯微鏡) | OVA sIgE 小鼠卵清蛋白特異性IgEELISA檢測試劑盒 |
磺酰羅丹明B/SRB細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 | sLR 小鼠可溶性瘦受體ELISA檢測試劑盒 |
XTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑 | DAO 小鼠二胺氧化ELISA檢測試劑盒 |
XTT細菌增殖及細菌毒性檢測試劑 | Alarma Blue細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒IGFBP-2 小鼠胰島樣生長因子結合蛋白2ELISA檢測試劑盒 |
CCK-8法細胞增殖檢測試劑盒 | SDF-1β/CXCL12 小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1βELISA檢測試劑盒 |
