土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意 :正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
土壤磷酸酶是一類(lèi)催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其適pH范圍,分為堿性、中性和酸性三種類(lèi)型磷酸酶。
土壤堿性磷酸酶(S-AKP/ALP)測(cè)試盒
測(cè)定原理:
堿性環(huán)境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成苯-酚和磷酸-氫二鈉,通過(guò)測(cè)定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水、無(wú)水乙醇和甲苯。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。用前加100mL蒸餾水充分溶解。
試劑三:液體×1瓶,4℃保存。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加576μL無(wú)水乙醇(自備),24μL蒸餾水充分溶解。(變褐色后不能再使用)
標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1瓶,0.5μmol/mL苯-酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。
催化反應(yīng):
稱(chēng)取風(fēng)干混勻土壤約0.1g,加入50μL甲苯(自備),輕搖15min;加400μL試劑一并且搖勻后,置于37℃恒溫培養(yǎng)箱,開(kāi)始計(jì)時(shí),催化反應(yīng)24h;到時(shí)后迅速加入1mL試劑二充分混勻,以終止酶催化的反應(yīng)。8000g,25℃離心10min,取上清液置于冰上待測(cè)。