土壤系列_土壤中性磷酸酶(S-NP)測試盒
測定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義：
土壤磷酸酶是催化土壤有機磷礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性，是評價土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強度的指標。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的顯著影響，根據(jù)適PH范圍，一般把土壤磷酸酶分為中性、酸性和堿性三種類型。
土壤系列_土壤中性磷酸酶(S-NP)測試盒
測定原理：
中性環(huán)境中，S-NP催化磷酸苯二鈉水解生成苯-酚和磷酸-氫二鈉，通過測定酚的生成量即可計算出NP活性。
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水、乙醇和甲苯。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。用前加100mL蒸餾水充分溶解。
試劑三：液體×1瓶，4℃保存。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加576μL無水乙醇（自備），24μL蒸餾水充分溶解。（變褐色后不能再使用）
標準品：液體×1瓶，0.5 μmol/mL酚標準液，4℃保存。
催化反應(yīng)：
稱取風(fēng)干混勻土壤約0.1g，加入50μL甲苯（自備），輕搖15min；加400μL試劑一并且搖勻后，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱，開始計時，催化反應(yīng)24h；到時后迅速加入1mL試劑二充分混勻，以終止酶催化的反應(yīng)。8000g，25℃離心10min，取上清液置于冰上待測。
顯色反應(yīng)：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長到660 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管：取微量玻璃比色皿/酶標板，加入10μL蒸餾水，20μL試劑三，4μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水166μL，混勻后25℃靜置30min，于660nm測定吸光度，記為A空白管。
3. 標準管：取微量玻璃比色皿/酶標板，加入10μL標準液，20μL試劑三，4μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水166μL，混勻后25℃靜置30 min，于660nm測定吸光度，記為A標準管。
4. 測定管：取微量玻璃比色皿/酶標板，加入10μL上清液，20μL試劑三，4μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水166μL，混勻后室溫25℃30 min，于660nm測定吸光度，記為A測定管。
注意：空白管和標準管只需測定一次。
