CAS:9015-85-4,T4 DNA連接酶,T4 DNA Ligase
英文名稱：T4 DNA Ligase
CAS號(hào)：9015-85-4
級(jí)別：BR
分子量：55.3kDa，單體
來源：含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度：1u/ul（200CEU/ul）
活性定義：是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中，37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量（weiss單位，1個(gè)weiss單位相當(dāng)于約200個(gè)粘性末端連接單位。1個(gè)粘性末端連接單位：20ul反應(yīng)體系（50mM Tris-HCL（PH7.5）, 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM（300ug/ml）的5-DNA末端）中，在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量）
酶活性分析混合物：66mM Tris-HCL（PH7.6）, 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分：20mM Tris-HCL（PH7.5）, 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA和50%（v/v）甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液（#B69）：400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP（PH7.5,25℃）
50% PEG溶液：50%（w/v）聚乙二醇4000
抑制劑：當(dāng)反應(yīng)體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時(shí)，可強(qiáng)烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活：65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意：聚乙二醇（PEG）可*地增加平末端DNA的連接效率，PEG4000在反應(yīng)體系中的*濃度為5%（w/v）；T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會(huì)改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率，為避免此現(xiàn)象，電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下：樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存；轉(zhuǎn)化時(shí)，連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細(xì)胞體積中的10%；電轉(zhuǎn)化之前，先用氯仿抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase，然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制：測試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測：粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀：液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團(tuán)和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵，還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口，連接DNA的粘性和平末端，但該酶對單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途：生化研究。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接；雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接；雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù)；連接酶介導(dǎo)的RNA檢測；位點(diǎn)特異性突變；擴(kuò)增片段長度多態(tài)性
保存： -20°C
CAS:9015-85-4,T4 DNA連接酶,T4 DNA Ligase 質(zhì)量品牌保證，價(jià)格公正，傾力為國內(nèi)國外生命科學(xué)研究人員提供*的產(chǎn)品。咨詢！
CAS:871-84-1，1,7-辛二炔，英文名稱：1,7-Octadiyne
2--4-硝基苯胺CAS:121-87-9,Chloro-4-nitroanil,密封保存,98%
硫酸鎳,規(guī)格型號(hào):AR500g
人*Ⅱ（FⅡ）Elisa試劑盒現(xiàn)貨，Human coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA試劑盒，96T/48T
CAS:638-02-8,2,5-二甲基噻吩,純度：99%,規(guī)格：5ml
*價(jià)格,Cholesterol,產(chǎn)地:國產(chǎn),規(guī)格：100g
硫酸*,KanamycinSulfate,產(chǎn)地:USB[分],規(guī)格:5g
96T/48T，Hpt/HP,牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白Elisa試劑盒Bovine Haptoglobin,Hpt/HP ELISA試劑盒
人schistosoma價(jià)格Elisa試劑盒,96T/48T,humanschistosomaELISA試劑盒
內(nèi)皮素（ET），方法:PR（進(jìn)口原料），標(biāo)準(zhǔn)范圍:，標(biāo)準(zhǔn)范圍:20-1620pg/ml，反應(yīng)溫度及時(shí)間:4℃24小時(shí)，加樣量:100μl
CAS:106-52-5,1-甲基-4-醇,純度：98%,規(guī)格：5g
CAS:119-36-8,*,純度：99%,規(guī)格：5ml
190906-92-4|2-甲基-4-氧代-1-羧酸-1,1-二甲基乙酯,產(chǎn)品名稱：2-甲基-4-氧代-1-羧酸-1,1-二甲基乙酯CasNo.：190906-92-4分子式：C11H19NO3分子量：213.27
E-0071，牛蒡子苷,標(biāo)準(zhǔn)品，Arctiin，≥98%
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