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上海哈靈生物科技有限公司
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乳酸脫氫酶（LDH）釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
2016-6-13 閱讀(1612)
我公司 乳酸脫氫酶（LDH）釋放法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)酶聯(lián)連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)檢測(cè)由于細(xì)胞損傷導(dǎo)致的細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定的乳酸脫氫酶釋放到細(xì)胞外，使四唑鹽染料碘硝基氯化四氮唑（INT）還原為紅色甲臜（farmazan），即比色法定量測(cè)定酶活性，以評(píng)價(jià)活體細(xì)胞繁殖的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種藥物、化學(xué)、環(huán)境因子和營(yíng)養(yǎng)因子處理的貼壁或懸浮生長(zhǎng)中的動(dòng)物或人體細(xì)胞。替代傳統(tǒng)的同位素[51 Cr]釋放檢測(cè)的選擇。
注意事項(xiàng)
- 本產(chǎn)品為100次（1個(gè)96孔板）操作
- 操作時(shí)須戴手套
- 整個(gè)操作須無(wú)菌操作
- 建議每個(gè)樣品安排3個(gè)孔，即重復(fù)3次，計(jì)算時(shí)取其平均值
- 檢測(cè)體系相應(yīng)增加，試劑用量按比例相應(yīng)增加：例如200微升檢測(cè)體系，試劑用量增加1倍
- 每孔中的培養(yǎng)液需100微升，避免使用周邊培養(yǎng)孔（常常液體蒸發(fā)而減少）
- 系統(tǒng)測(cè)試，可以加入10微升標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent G）到50微升無(wú)細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)液里，然后加入反應(yīng)液和顯色液即可
- 細(xì)胞裂解效果不佳，可以使用20微升裂解液（Reagent A）處理
- 孵育時(shí)，須避光
- 染色完成后，建議即刻檢測(cè)，zui遲不得超過(guò)1小時(shí)
- 細(xì)胞培養(yǎng)和處理時(shí)，避免使用草酸（OXALATE），草氨酸（OXAMATE）和EDTA，否則影響檢測(cè)的準(zhǔn)確性
- 血清含有乳酸脫氫酶，建議使用濃度不要超過(guò)1％
- 細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)、密度過(guò)高、離心速度過(guò)大、培養(yǎng)箱內(nèi)外溫差過(guò)大等因素會(huì)造成細(xì)胞自然釋放乳酸脫氫酶
- 酚紅會(huì)干擾檢測(cè)
- 樣品zui大酶活性對(duì)照孔或zui大OD吸光讀數(shù)與細(xì)胞裂解程度密切相關(guān)
- 如果用戶沒(méi)有孔板離心機(jī)，則移取上清液時(shí)格外小心
- 如果用戶沒(méi)有匹配的波長(zhǎng)，可以使用波長(zhǎng)470nm至570nm之間的任一波長(zhǎng)替代
