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上海哈靈生物科技有限公司
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基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）明膠酶譜法電泳分析試劑盒產(chǎn)品說明書
2016-6-20 閱讀(585)
主要用途
我公司基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）明膠酶譜法（gelatin-zymography）電泳分析試劑是一種旨在通過明膠聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法，在分離、蛋白復(fù)性、底物水解、染色等一系列步驟下，觀察并半定量深藍(lán)色背景中的無色清晰的基質(zhì)金屬蛋白酶條帶，根據(jù)分子量確定特異基質(zhì)金屬蛋白酶及其活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞萃取樣品（動物、人體、植物、昆蟲等）、培養(yǎng)上清懸液、血清和關(guān)節(jié)滑液或腦脊液等基質(zhì)金屬蛋白酶-2，9，以及13等活性及其抑制劑的檢測。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作便捷，敏感度高，條帶清晰，重復(fù)性好。
注意事項(xiàng)
- 本產(chǎn)品為5次（45個(gè)樣品）操作
- 操作時(shí)，須戴手套
- 樣品準(zhǔn)備要點(diǎn)如下：
- 必須澄清，至關(guān)重要：4℃高速離心5分鐘，速度為10000g，置于－70℃保存待測
- 樣品中避免使用EDTA、EGTA等二價(jià)陽離子鰲和劑以及巰基乙醇和DTT等
- 樣品中避免使用硫醇抑制劑（THIOL INHIBITOR）
- 由于TIMP等天然抑制劑的存在，血清樣品中的基質(zhì)金屬蛋白酶活性很低，可以使用活化劑（建議使用膠原酶潛酶活化劑（APMA）－12197）
- 如果驗(yàn)證樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶，可以使用抑制劑EDTA對照
- 避免培養(yǎng)細(xì)胞上清樣品顯示黃色，表明已經(jīng)過于酸性，須調(diào)整pH為中性方可使用
- 膠體和膠頂配制前，須25℃預(yù)熱相關(guān)試劑
- 電泳前注意清洗樣品孔
- 電泳運(yùn)行，注意安全
- 染色時(shí)，避免光照
