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細(xì)胞酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法

2015-5-13  閱讀(573)

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【詳細(xì)說明】

主要用途


 細(xì)胞酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后,產(chǎn)生多巴色素,呈現(xiàn)吸光峰值的變化,即采用比色法來測定細(xì)胞裂解懸液樣品中酶活性而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種人體和動物細(xì)胞,尤其是黑色素細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測,以及抑制劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。


技術(shù)背景


酪氨酸酶(tyrosinase;EC1.14.18.1)是一種單酚單加氧酶(monophenol monooxygenase),又稱為單酚酶(monophenolase)或單酚 二羥基苯丙氨酸:O2 氧化還原酶(monophenol dihydroxyphenylalanin:O2 oxidoreductase),具有雙功能的含銅糖蛋白,廣泛存在于植物、酵母和動物組織中,其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個跨膜蛋白,而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細(xì)胞(melanocyte)或色素細(xì)胞的黑色素器(melanosome)里。酪氨酸酶通過催化L-酪氨酸(L-tyrosine)等的o-羥基化(o-hydroxylation)反應(yīng)變成L-多巴(L-dopamine),進(jìn)而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌(dopaquinone),從而由多巴色素(dopachrome)轉(zhuǎn)化為黑色素(melanin)中的真黑素(eumelanin),以及其它色素,包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性,嚴(yán)重時,會引起色素沉著(hyperpigmentation)。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化?。╫culocutaneous albinism)。酪氨酸酶抑制劑成為增白化妝品的重要元素。基于底物酪氨酸,在酪氨酸酶的催化下,產(chǎn)生多巴色素,通過其吸光值的變化(475nm波長),來定量測定酪氨酸酶的活性。反應(yīng)系統(tǒng)為:



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