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上海哈靈生物科技有限公司

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bEnd.3 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū)

2015-9-18  閱讀(736)

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【詳細(xì)說(shuō)明】

小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞T25瓶細(xì)胞處理方法

收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題,請(qǐng)即時(shí) 。并進(jìn)行以下操作:

1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2.肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(40×,100×,200×各一張)。

3.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫1-2小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

4.預(yù)熱培養(yǎng)基(含 10%胎牛血清,1%雙抗)。

5.若細(xì)胞密度較小,無(wú)菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的 5-6ml  培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以上,進(jìn)行傳代。

6.若細(xì)胞密度較大,達(dá)到 80%以上,將細(xì)胞傳到 10cm  培養(yǎng)皿培養(yǎng)。

7.傳代時(shí),T25 瓶里保留部分細(xì)胞,同步培養(yǎng),直到能確保 10cm  培養(yǎng)皿中的細(xì)胞狀態(tài)良好。



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