QIAGEN Large-Construct Kit使用經(jīng)優(yōu)化的重力流操作，獲得的DNA的純度顯著高于其他常規(guī)方法獲得的DNA的純度。*的ATP-dependent外切酶消化步驟，確保特異性去除基因組DNA。

QIAGEN Large-Construct Kit含有的QIAGEN-tips中*的陰離子交換樹脂專為核酸純化設(shè)計(jì)。其出色的核酸分離特性可純化得到高純度DNA，相當(dāng)于經(jīng)過兩次氯化銫梯度離心得到的純度。預(yù)裝的QIAGEN-tips（參見Anion-exchange tips）運(yùn)用重力沉降原理，減少了質(zhì)粒制備過程所需的手工操作時(shí)間。整個(gè)QIAGEN質(zhì)粒純化系統(tǒng)不使用*、氯仿、溴乙錠和氯化銫等有毒物質(zhì)，zui大程度減小了對使用者及環(huán)境的危害。

使用堿裂解法裂解多達(dá)500 ml的培養(yǎng)液后（參見QIAGEN Plasmid Kit procedures），使用試劑盒中的ATP-dependent外切酶進(jìn)行消化，確保特異性去除基因組DNA及缺損的高分子量DNA。之后將樣本上樣至陰離子交換柱，在適當(dāng)?shù)牡望}濃度和pH值條件下，質(zhì)粒DNA與樹脂特異性結(jié)合。用中等鹽濃度的緩沖液洗滌，去除RNA、蛋白質(zhì)、代謝物和其他小分子的雜質(zhì)。用高鹽緩沖液洗脫已去除基因組DNA的純化質(zhì)粒DNA。加入異丙醇使DNA濃縮和脫鹽，之后離心收集。

QIAGEN Large-Construct Kit純化獲得的DNA適用于各種下游應(yīng)用，包括：

亞克隆和鳥槍法制備DNA文庫

對高分子量DNA直接進(jìn)行測序

轉(zhuǎn)染