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高品質(zhì) 北京低* *QIAGEN Plasmid Plus Giga Kit

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更新時(shí)間:2022-08-03 13:42:16瀏覽次數(shù):679次

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高品質(zhì) 北京低* *QIAGEN Plasmid Plus Giga Kit

 

高品質(zhì) 北京低* *QIAGEN Plasmid Plus Giga Kit

性能
穩(wěn)定的質(zhì)量和性能

QIAGEN Plasmid Plus技術(shù)可達(dá)到與陰離子交換技術(shù)相同的性能和品質(zhì)。QIAGEN Plasmid Plus純化柱提供*的結(jié)合試劑確保得到高純度質(zhì)粒DNA。應(yīng)用QIAGEN Plasmid Plus Giga Kit,可獲得多達(dá)10 mg的高純度質(zhì)粒DNA,無RNA、蛋白質(zhì)和基因組DNA等污染物(參見High yields are ensured with QIAGEN Plasmid Plus Kits (QPP)和Analytical chromatogram)。

轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒DNA,內(nèi)毒素水平低

內(nèi)毒素,又名脂多糖或LPS,在純化質(zhì)粒過程的裂解步驟釋放,是革蘭氏陰性菌如E. coli細(xì)胞膜的組成部分。內(nèi)毒素能引起非特異性免疫應(yīng)答,這是轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的非可控變量,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果和重復(fù)性,使其難以比較和解釋。

該試劑盒提供的洗滌緩沖液可將內(nèi)毒素水平降至1 EU/μg DNA以下。(依宿主菌、培養(yǎng)基和細(xì)胞密度的不同而不同,如果細(xì)胞密度較高,內(nèi)毒素水平也略高,在1–3 EU/μg DNA范圍內(nèi)。)這使得到的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用,包括在敏感細(xì)胞系中轉(zhuǎn)染(參見Endotoxin levels using QIAGEN Plasmid Plus Kits、Endotoxin levels using different isolation methods、Efficient transfection in sensitive cell lines和Superior performance compared to other suppliers)。 

原理

使用QIAGEN Plasmid Plus Giga Kit進(jìn)行大規(guī)模質(zhì)粒純化,方便快捷。*設(shè)計(jì)的QIAGEN Plasmid Plus純化柱和創(chuàng)新的結(jié)合試劑,使其只需簡(jiǎn)單的結(jié)合–洗滌–洗脫過程。QIAGEN Plasmid Plus Kits可在40–50分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)快速大規(guī)模的giga質(zhì)粒制備。得到高濃度質(zhì)粒DNA,無需乙醇沉淀可直接用于下游各種應(yīng)用。該質(zhì)粒DNA適用于要求小體積量的應(yīng)用。

使用LyseBlue試劑,產(chǎn)量zui大化

該試劑盒也包含LyseBlue指示劑,用于指示*的緩沖液混合狀態(tài)。通過簡(jiǎn)單的顏色變化,就可避免常見的手動(dòng)操作失誤,防止細(xì)胞裂解不充分及SDS、基因組DNA和細(xì)胞碎片沉淀不*。這種*的緩沖液添加劑確保了細(xì)胞充分裂解和*中和,使產(chǎn)量zui大化。

操作流程
QIAGEN Plasmid Plus Kits提供的QIAfilter試劑條能快速澄清裂解液,一步即可將裂解液裝入柱中,節(jié)約時(shí)間。使用真空裝置(如QIAvac 24 Plus配合QIAvac holder)抽吸澄清的裂解液及后續(xù)的洗滌緩沖液,使其流過QIAGEN Plasmid Plus離心柱。將膜洗滌和干燥后,即可通過離心獲得高濃度DNA(參見QIAGEN Plasmid Plus procedure)。
應(yīng)用

QIAGEN Plasmid Plus Giga Kit純化得到的轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用,例如:

轉(zhuǎn)染多數(shù)細(xì)胞系(敏感細(xì)胞系如Huh-7)
限制性酶切
克隆 
體外轉(zhuǎn)錄和翻譯

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