培養(yǎng)基細胞的生命期分有幾個階段

　　所謂培養(yǎng)基細胞生命期，是指細胞在培養(yǎng)中持續(xù)增殖和生長的時間。體內(nèi)組織細胞的生存期與完整機體的死亡衰老基本相一致。組織和細胞在培養(yǎng)中生命期如何？這要看細胞的種類、性狀和原供體的年齡等情況。人胚二倍體成纖維細胞培養(yǎng)，在不凍存和反復傳代條件下，可傳30～50代，相當于150～300個細胞增殖周期。如供體為成體或衰老個體，則生存時間較短；如培養(yǎng)的為其它細胞如肝細胞或腎細胞培養(yǎng)基，生存時間更短，僅能傳幾代或十幾代。只有當細胞發(fā)生遺傳性改變，如獲永生性或惡性轉(zhuǎn)化時，細胞的生存期才可能發(fā)生改變。對此以后將詳述。

　　正常細胞培養(yǎng)時，不論細胞的種類和供體的年齡如何，在細胞全生存過程中，大致都經(jīng)歷以下三個階段：

　　1．原代培養(yǎng)基期：

　　也稱初代培養(yǎng)，即從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到*次傳代階段，一般持續(xù)1一4周。此期細胞呈活躍的移動，可見細胞分裂，但不旺盛。初代培養(yǎng)細胞與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上相似性大。細胞群是異質(zhì)的，也即各細胞的遺傳性狀互不相同，細胞相互依存性強。如把這種細胞群稀釋分散成單細胞，在軟瓊脂培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)時，細胞克隆形成率很低，即細胞獨立生存性差。克隆形成率即細胞群被稀釋分散成單個細胞進行培養(yǎng)時，形成細胞小群（克?。┑陌俜謹?shù)。初代培養(yǎng)細胞多呈二倍體核型；由于原代培養(yǎng)細胞和體內(nèi)細胞性狀相似性大，是檢測藥物很好的實驗對象。

　　2．傳代期：

　　初代培養(yǎng)基細胞一經(jīng)傳代后便改稱做細胞系。在全生命期中此期的持續(xù)時間zui長。在培養(yǎng)條件較好情況下，細胞增殖旺盛，并能維持二倍體核型，呈二倍體核型的細胞稱二倍體細胞系。為保持二倍體細胞性質(zhì)，細胞應在初代培養(yǎng)基期或傳代后早期凍存。當前世界上常用細胞均在不出十代內(nèi)凍存。如不凍存，則需反復傳代以維持細胞的適宜密度，以利于生存。但這樣就有可能導致細胞失掉二倍體性質(zhì)或發(fā)生轉(zhuǎn)化。一般情況下當傳代10～50次左右，細胞增殖逐漸緩慢，以至*停止，細胞進入第三期。

　　3．衰退期：

　　此期細胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖；細胞培養(yǎng)基形態(tài)輪廓增強，zui后衰退凋亡。在細胞生命期階段，少數(shù)情況下，在以上三期任何一點（多發(fā)生在傳代末或衰退期），由于某種因素的影響，細胞可能發(fā)生自發(fā)轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化的標志之一是細胞可能獲得永生性或惡性性。細胞永生性也稱不死性，即細胞獲持久性增殖能力，這樣的細胞群體稱無限細胞系，也稱連續(xù)細胞系。在早期文獻中無限細胞系也稱已建立細胞系，現(xiàn)已不用。無限細胞系的形成主要發(fā)生在第二期末，或第三期初階段。細胞培養(yǎng)基獲不死性后，核型大多變成異倍體。細胞轉(zhuǎn)化亦可用人工方法誘發(fā)，轉(zhuǎn)化后的細胞也可能具有惡性性質(zhì)。細胞永生性和惡性性非同一性狀。