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液體樣本甘油測定試劑盒

時間:2022/10/20閱讀:548
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液體樣本甘油測定試劑盒檢測原理


描述:甘油是甘油三酯的水解產(chǎn)物。脂蛋白酯酶能水解血液中的甘油三酯;胰脂酶可以水解食 物中的甘油三酯;激素敏感脂肪分解酶能水解脂肪細(xì)胞中的甘油三酯。與游離脂肪酸一樣,甘 油含量是甘油三酯水解反應(yīng)的可靠檢測指標(biāo),但檢測更方便。本試劑盒采用甘油磷酸氧化酶法 和經(jīng)典 GPO-Trinder 酶學(xué)反應(yīng)相結(jié)合的方法,通過比色法測定液體樣本中的甘油含量。經(jīng)過優(yōu) 化后,操作步驟更加簡單,檢測線性范圍在 10-1200μmol/L,可靠性和重復(fù)性俱佳,適合生物 醫(yī)學(xué)、食品實(shí)驗(yàn)室檢測。



操作步驟:

一. 樣本處理: 酒類、飲品、清澈液體樣本:可直接進(jìn)行測定,如超過線性范圍可用蒸餾水或生理鹽水稀釋后 再測定。 培養(yǎng)液:取不含酚紅、無顏色、無血清的細(xì)胞培養(yǎng)基,如有細(xì)胞碎片應(yīng) 4oC,,12,000g 離心 5min, 取上清進(jìn)行測定。 血液:新鮮抗凝血,4oC,2,000g 離心 5min 得到血漿;非抗凝血,先 4oC 靜置 2h 得到血清后, 2000g 離心 10min,除去血細(xì)胞。將得到的血漿/血清 70oC 加熱 10 分鐘滅活內(nèi)源脂肪酶,12,000g 離心 10min ,取上清測定或-20oC 保存。 二 .工作溶液配制:按 4:1 比例,取 4 ml 試劑 R1 與 1 ml 試劑 R2 混合,立即使用或 4oC 保存 <1 天,變色棄去。 三 .標(biāo)準(zhǔn)品稀釋:用蒸餾水、生理鹽水或與樣品緩沖液一致的液體,將 4 mM 甘油標(biāo)準(zhǔn)品倍比稀 釋為 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 μmol/L,通常取其中 4~6 管即可, 注意設(shè)置 0 濃度對照反應(yīng)管。


原理:在 ATP 存在下甘油被甘油激酶磷酸化為 3-磷酸甘油,再被甘油磷酸氧化酶氧化產(chǎn)生過氧 化氫;在過氧化物酶作用下生色底物轉(zhuǎn)化為苯醌亞胺,其光密度值與甘油濃度成正比。


液體樣本甘油測定試劑盒檢測原理

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