DMD是由dystrophin基因中一種功能缺失突變所引起的嚴(yán)重肌肉退行性疾病。當(dāng)前除了姑息療法患者能夠獲得的治療非常少。這些酶已迅速成為分子生物學(xué)中的寶貴工具。使得科學(xué)家們能夠在特異位點(diǎn)切割基因，然后改變殘留部分生成他們感興趣的基因組序列。
然而，可編程的核酸酶并非無懈可擊，它們往往會(huì)錯(cuò)誤地編輯與靶序列相似但又存在幾個(gè)堿基對(duì)差異的序列，由于有導(dǎo)致有害突變的可能性，使得它們無法可靠地應(yīng)用于臨床。
出于這一原因，iPS細(xì)胞是一種理想的模型，因?yàn)樗鼈兛蔀檠芯咳藛T提供豐富的患者細(xì)胞來測(cè)試可編程核酸酶，尋找*條件來將脫靶修飾減至zui少。
研究人員因此構(gòu)建出了在包含這一外顯子的基因組區(qū)域中出現(xiàn)的一些*序列的直方圖。他們?cè)诘?/span>45號(hào)外顯子中發(fā)現(xiàn)一堆*序列。近一半的人類基因組都是由重復(fù)序列組成。因此即便我們找到了一條*序列，一個(gè)或兩個(gè)堿基對(duì)的改變都有可能造成其他的重復(fù)序列，帶來在錯(cuò)誤區(qū)域進(jìn)行TALEN或CRISPR編輯的風(fēng)險(xiǎn)。為了避免這一問題，我們找到了一個(gè)在這一直方圖中居高的一個(gè)區(qū)域。
有了這一靶標(biāo)，該研究小組想到了三種策略來修正dystrophin基因的移碼突變：通過連接第43號(hào)和46號(hào)外顯子達(dá)到外顯子跳躍（exon skipping）修復(fù)閱讀框；通過摻入插入突變或缺失（indel）突變來實(shí)現(xiàn)移碼，以及在第45號(hào)外顯子之前插入第44號(hào)外顯子來敲入外顯子。
利用iPS細(xì)胞技術(shù)結(jié)合TALEN或CRISPR可以治療DMD?，F(xiàn)在該研究小組的目標(biāo)是將這一方案擴(kuò)展到其他疾病。證實(shí)了TALEN和CRISPR可用來糾正DMD基因突變。我希望可以將這些核酸酶應(yīng)用于糾正其他遺傳疾病如點(diǎn)突變一類的突變。
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